菌落观察.ppt

金黄色葡萄球菌的生物学特性 典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8μm左右，显微镜下排列成葡萄串状。金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。 培养特性： 易培养，对营养要求不高，在普通培养基中生长良好。 需氧或兼性厌氧。 最适生长温度37°C，最适生长pH 7.4。耐盐性强，在含10～15%的氯化钠培养基中仍能生长，可用于筛选菌种。 在普通营养琼脂平板上培养18～24ｈ，可形成圆形、表面光滑、不透明的菌落。可产生金黄色色素，色素为脂溶性，不溶于水，故色素只局限于菌落内，不渗至培养中。 在血平板上可形成明显透明的溶血环。为β型溶血。 金黄色葡萄球菌的菌落形态：呈金黄色，有时也呈白色，大而突起，圆形、不透明、表面光滑，周围有透明的β溶血环。 大肠杆菌 大肠杆菌的历史 肠杆菌科,为革兰氏阴性杆菌。根据生化反应、血清学试验、DNA同源性研究，肠杆菌科至少包括28个菌属，110个以上的菌种。 埃希菌属（Escherichia）中最重要的是大肠埃希菌(E. coli) ，常称为大肠杆菌。 大肠杆菌广泛分布于自然界，包括腐生菌、寄生菌和人及动物的病原菌。多数是人和动物肠道正常菌群的重要成员。 20世纪中叶，认识到一些特殊血清型的大肠杆菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜（禽），常引起严重腹泻和败血症。 一 、大肠杆菌的一般特性 1、G－直短杆菌，两端钝圆，散在或成对。 2、周身鞭毛，能运动，无芽孢 ，有的有荚膜。3、代谢能力强，代谢类型是异养，兼性厌氧型 。 二 、培养及生化特性 1、培养特性 ① 兼性厌氧；　　　　 ② 最适生长温度37℃，最适生长pH7.2～7.6；　　　　 ③ 普通琼脂培养基：生长良好，圆形凸起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落，直径约2~3mm； ④ 普通肉汤培养基：均匀浑浊，管底有粘性沉淀，液面管壁有菌环。 肠产毒性大肠杆菌（ETEC） 金黄色葡萄球菌的重要鉴定-血浆凝固酶试验 试验原理：致病性的金黄色葡萄球菌产生的血浆凝固酶，使血浆中纤维蛋白原转变为纤蛋白，附着于细菌表面 ，产生凝固。 金黄色葡萄球菌可产生两种凝固酶：一种是与细胞壁结合的凝固酶，为结合凝固酶；另一种是菌细胞释放于培养基中，为游离凝固酶。二者的抗原性不同。 血浆凝固酶试验 挑取Baird－Parker平板或血平板上可疑菌落1个或以上，分别接种到5mL BHI和营养琼脂小斜面，36℃±1℃培养18 h～24 h。 取新鲜配置兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加入可疑菌落的BHI培养物0.2mL～0.3mL，振荡摇匀，置36℃±1℃温箱或水浴箱内，每半小时观察一次，观察6h，如呈现凝固（即将试管倾斜或倒置时，呈现凝块）或凝固体积大于原体积的一半，判定为阳性结果。 同时以血浆凝固酶试验阳性和阴性葡萄球菌菌株的肉汤培养物作为对照。 结果如可疑，挑取营养琼脂小斜面的菌落到5mL BHI，36℃±1℃培养18h～48h，重复实验。 结果报告 如血浆凝固酶试验阳性，可判定为金黄色葡萄球菌 。 报告在25g（mL）样品中检出或未检出金黄色葡萄球菌。 * 革兰染色 ETEC是致人和幼畜腹泻最常见的病原菌；毒力因子有粘附素性菌毛和肠毒素。 致病过程 *