高度特异性分离化带有标签的重组膜蛋白.docVIP

产品名称：PureCube Rho1D4 Agarose德国生产商介绍德国Cube Biotech是一家专注于蛋白纯化产品的生产商和服务商，尤其擅长于蛋白纯化及膜蛋白纯化。Cube Biotech研发团队拥有逾40年经验致力于膜蛋白的表达、纯化和结晶等研究。在医学研究相关的人体膜蛋白等方面，如:转运蛋白或G蛋白偶联受体(GPCRs)等有效的药物设计取决于膜蛋白结构信息的表达，依托在蛋白和膜蛋白生物化学和有机化学等技术的实力，Cube Biotech将专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列产品产业化，现已与全球多家高校实验室、科研机构、制药企业成为紧密的长期合作伙伴，推进了欧美膜蛋白研究的进展。德国Cube Biotech系列产品应用已刊登在等期刊，并且PureCube Rho1D4琼脂糖产品应用已被Springer旗下Human Press出版社出版的Methods in Molecular Biology Series分子生物学方法系列实验指南丛书所采用。 产品简介PureCube Rho1D4 Agarose是针对Rho1D4标签膜蛋白的亲和层析产品，Rho1D4纯化体系是基于Rho1D4抗体与融合蛋白表面Rho1D4表位的高特异性结合而研发的，适用于膜蛋白的纯化。具有Rho1D4表位序列标签的膜蛋白可以通过PureCube Rho1D4 Agarose，利用Rho-tag高特异性来纯化。德国Cube Biotech技术团队依托在蛋白和膜蛋白生物化学和有机化学等技术的实力，将专用于膜蛋白纯化的Rho1D4系列蛋白纯化体系的免疫亲和产品产业化。 产品优势： 1）；2）结合可高达3-4mg/mL； 3）； 4）可重复再生使用； 5）有效的膜蛋白研究解决方案配合Nanodisc产品使用； 6）PureCube Rho1D4琼脂糖产品应用已被Springer旗下Human Press出版社出版的Methods in Molecular Biology Series分子生物学方法系列实验指南丛书所采用Mattle, D. et al. (2015) Mammalian Expression, Purification, and Crystallization of Rhodopsin Variants. Beata Jastrzebska (ed), Rhodopsin: Methods and Protocols. Methods in Molecular Biology, vol. 1271, Chapter 3, DOI 10.1007/978-1-4939-2330-4_3, Springer Science +Business Media New York 产品详解： 对膜蛋白提取有高特异性和高产量 每个批次的PureCube凝胶均是按照严格的质量标准体系生产并严格检验，以确保每一批分装的产品都有高的蛋白结合能力。通过与特异性抗原表位相互作用，辅以优化过的纯化操作步骤，能使目标蛋白在洗脱组分中有高产出量。图1是对CXC趋化因子受体4(CXCR4)的纯化溶于Fos-Choline?-14的带标签蛋白通过大肠杆菌表达，再经由含PureCube Rho1D4琼脂糖的层析柱纯化。用Rho1D4多肽作为洗脱液，4次洗脱组分每毫升共收集到0.8mg、1.0mg、0.85mg和0.6mg目标蛋白。蛋白印迹结果说明CXCR4大约是65 kDa和35 kDa。这些条带是39.7 kDa膜蛋白的二聚体和单体。单体、二聚体的分离以及去除洗脱肽段，可以通过排阻层析的方法实现。 图1：用PureCube Rho1D4琼脂糖纯化CXCR4。大肠杆菌裂解液（TL）溶解在Fos-Choline?-14中，溶解的组分（SF）与装有Rho1D4抗体的免疫亲和层析柱相结合。平衡组分中没有测得损失目标蛋白，经分光光度计测定，CXCR4在洗脱组分（E1-E4）中得浓度范围在0.6-1.0mg/mL。 什么是Rho1D4? Rho1D4是细胞内牛视紫红质C末端的最后九位氨基酸。Rho1D4得名于与该序列特异性结合的单克隆抗体。该表位通过与Rho1D4抗体结合可作为针对膜蛋白的高特异性纯化标签。 蛋白 表达系统 纯度 产率（所有回收蛋白） 采取的纯化步骤 hVN1R1 G蛋白偶联受体 可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物） 90% 1mg/1g细胞 Rho1D4 IAC+SEC FPR3 G蛋白偶联受体 可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物） 90% 2mg/6g细胞 Rho1D4 IAC+SEC TAAR5 G蛋白偶联受体 可诱导的HEK293S细胞系（哺乳动物） 90% 1mg/9g细胞 Rho1D4 IAC+SEC OR131-2 G蛋白偶联受