P1P2P3Prepare质粒抽提溶液.docVIP

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P1P2P3Prepare质粒抽提溶液

质粒抽提溶液(I,II,III) Solution I?配制:100ml/瓶 mM/mol Tris HCl pH8.0 ?: 1M Tris-HCl pH8.0 ?? 5 ml EDTA: 0.5M?EDTA?pH8.0 ?2 ml 加ddH2O定容至: 93 ml 附:1M Tris-HCl pH8.0 ?? 配制: 50ml Tris-base称量?6.05g 加水40ml溶解 加入HCl 约3~4ml 后 继续用HCl调pH至8.0 加ddH2O定容至50ml 0.5M EDTA pH8.0 配制: 50ml EDTA钠盐 9.306g NaOH 1g 加水40ml溶解 用1N NaOH调pH至8.0 最后定容至50ml Solution II: 配制:0.2N NaOH, 1%SDS使用前新鲜配制: miniprep: 200ul/管? 10M NaOH?? 4 ul 10% SDS?? 20 ul ddH2O??? 176 ul macroprep: 10ml/管? 10M NaOH 200 ul 10% SDS 1 ml ddH2O 8.8 ml 1000 ml 500 ml 100 ml 10M NaOH 20 ml 10 ml 2 ml 10% SDS 100 ml 50 ml 10 ml ddH2O 880 ml 440 ml 88 ml 10M NaOH 配制:50ml 装于塑料瓶中 称量 NaOH?20 g 100ml 装于塑料瓶中 称量 NaOH? 40 g 10% SDS? 用前37度预热 配制:100ml 称量 SDS??? 10 g Solution III?? 配制: 100ml/瓶 4度保存 5M KAc 60 ml 冰醋酸 11.5 ml ddH2O 28.5 ml 5M KAc? KAC: 29.4g M 98g/mol ddH2O: 60 ml 1

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