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生物化学开题报告 给予不同浓度的四氧嘧啶对大鼠 Ⅰ型糖尿病模型的影响 研究目的及意义： 小鼠糖尿病模型替代人类糖尿病患者用于治疗糖尿病，明确四氧嘧啶造出标准Ⅰ型糖尿病的最佳剂量、以及明确治疗的机理，最终用于临床治疗，为糖尿病患者带去福音。本实验的目的就是为了做出一种具有临床相似性，重复性好的小鼠糖尿病个体。 研究背景： 近年来，随着我国社会经济条件的改善，人民生活水平的不断提高，饮食结构的改变，劳动强度的减低，人群平均寿命延长，应激状态增多，以及糖尿病检测手段的改进，与世界各国一样，糖尿病患病率在逐渐上升，糖尿病对我国人民健康的影响日趋严重，我国虽属世界上糖尿病低患病率国家，但糖尿病患者的人数已居世界第二位(仅次于美国)，增加速度惊人。据初步统计我国糖尿病患者总数约3600万人，其中Ⅰ型糖尿病的患者占5%，总数约200万人，我国Ⅰ型糖尿病的发病率约为0.7～1.0/10万。我国Ⅱ型糖尿病的患病率增长较快，据1979年在我国30万人口中的调查，糖尿病患病率为0.6%，1989年为2.02%，年均增长0.1%左右，1994年我国普查20万人口，患病率已上升为2.5%，目前20～75岁人群中糖尿病患病率约为3%左右。糖耐量低减患者不低于3%。 Ⅰ型糖尿病：胰岛B细胞受损， 常导致胰岛素绝对缺乏，所以需要依赖胰岛素治疗，也就是说患者从发病开始就需使用胰岛素治疗，并且终身使用 。 1.为什么选用用四氧嘧啶？由于四氧嘧啶诱导的大鼠糖尿病模型与人类Ⅰ型即胰岛素依赖性糖尿病类似，故四氧嘧啶是制备大鼠糖尿病模型的常用药物。 2.四氧嘧啶的作用机理是什么？ 其作用机制是通过产生超氧自由基选择性地破坏胰岛B 细胞,使细胞内DNA 损伤,同时激活多聚ADP 核糖体合成酶的活性,从而使辅酶Ⅰ含量下降,两者共同作用导致mRNA 功能受损,引起细胞死亡，导致血中胰岛素浓度下降及高血糖产生，形成胰岛素依赖性Ⅰ型糖尿病。本文主要探讨四氧嘧啶在糖尿病大鼠模型中的应用,通过研究大鼠两种不同的给药方式致糖尿病模型差异,旨在为制造稳定的大鼠糖尿病模型选择一种最佳方案。 3.做出与临床一致的Ⅰ型糖尿病模型需用四氧嘧啶的最佳浓度是多少？ 下面我们将一起去探究 技术路线： 实验材料的购买 实验前的准备 实验处理方法 实验数据的收集 实验后的照顾 实验结果的处理 实验所需材料： 实验动物 雄性SD大鼠80 只，清洁级，体重190-220g，购自 四川医学科学院实验动物 中心。 试 剂 四氧嘧啶（alloxan，ALX，美国Sigma公司）使用 前 用生理盐水配成不同浓度。 生理盐水购自四川科伦医药公司。 仪 器 One2touch血糖仪（稳豪型）和血糖试 纸（产品 型号 HEA-215 25针+25片）,美 国强生公司生产。 注射器购自四川省广元市康康医疗器械有限公司。 自制简易大鼠固定器 显微镜购于淘宝 造模前准备： 在开始造模前将80只大鼠随机分成A,B,C,D,E五组，接着五组均禁食12h。 取四氧嘧啶分别配置成为体积分数为2%，4%， 6%… 接着…… 不作任何处理 腹腔注射生理盐水10ml 腹腔注射2%的四氧嘧啶10ml 腹腔注射4%的四氧嘧啶10ml 腹腔注射6%的四氧嘧啶10ml 造模后在日照时间10h 以上的阳光充足的条件下饲养一周。 一周后分别抽取大鼠眼眶静脉或尾静脉血液做血糖测定，或者收集大鼠尿液做血糖测定。 造模成功指标 上法测定的血糖浓度高于9.99 mmol/L为造模成功的Ⅰ型糖尿病大鼠 1 2 3 4 5 6 … 16 A组 B组 C 组 D组 E组 组别 每组大鼠 编号 血糖浓度 可行性分析： 大鼠易得到，容易饲养，在科研工作中被广 泛利用。 手术器材和设备均为实验室常用，四氧嘧 啶购买方便 。 大鼠为哺乳类动物，与人体的构造级生理 方面比较相似，具有高的的可靠性。 实验步骤简单。 统计学方法分析实验结果： 将实验数据输入电脑软件采用SPSS15.0软件进行统计学分析。P0.05为差异有显著性 参