第四章 清洗与消毒.ppt

第四章 清洗与消毒 一、清洗 主要针对新的或重新使用的器皿，清除杂质和微生物，使其不残留任何影响细胞生长的成分。 有害物质：微生物 细胞残余物 非营养成分的化学物质 1. 玻璃器皿的清洗 浸泡（清水浸泡、5%稀盐酸浸泡过夜）→刷洗（软毛刷、优质洗涤剂）→浸酸（不少于6小时，一般过夜）→冲洗（自来水十遍，蒸馏水2～3次） →晾干备用 要求：干净透明、无油迹，不能残留任何物质 成分 强酸清洁液 次强酸清洁液 弱酸清洁液 重铬酸钾（g) 63 120 100 硫酸(ml) 1000 200 100 蒸馏水(ml) 200 200 1000 棕红色 深绿色，要重新配制 2. 橡胶制品的清洗 自来水浸泡→ 0.5mol/L NaOH煮沸10 ～ 15 min（除掉蛋白质）→流水冲洗→ 0.5mol/L HCl浸泡 30 min→流水冲洗→ 自来水冲洗2次→蒸馏水清洗2 ～ 3次 →50℃烤干备用。 3. 塑料器皿的清洗 浸泡（洗涤剂）→冲洗（自来水10遍，蒸馏水3次） → 70%乙醇冲洗→无水乙醇冲洗1次→无菌室内紫外线照射晾干 4. 不锈钢除菌滤器的清洗 新的或使用后的流水冲洗15min→三蒸水冲洗滤器2 ～ 3次→ 干燥备用 去离子水浸泡滤膜24h→安装滤器→消毒灭菌 。 包装: 对细胞培养用品进行消毒前，要进行严密包装，以便于消毒和贮存。常用的包装材料：牛皮纸、硫酸纸、棉布、铝饭盒、较大培养皿等，近几年用铝箔包装，非常方便，适用。培养皿、注射器、金属器械等用牛皮纸包装后再装入饭盒内，较大的器皿可以进行局部包扎。 二、消毒和灭菌 主要针对微生物污染 ◆ 物理消毒法 1、紫外线消毒 是一种低能量的电磁辐射，可以杀灭多种微生物，多用于无菌室空气、地面以及超净工作台面的消毒。消毒效果与辐射强度和照射剂量呈正相关，辐射强度随距灯管距离的增加而降低，照射剂量和照射时间呈正比。 缺点：穿透力弱；产生臭氧，污染空气，对身体有害。 2、电离辐射灭菌 以60Co、X射线和电子加速器产生的加速离子辐照物品杀灭微生物的方法。 优点：灭菌时物品不会升温，尤其适用不耐热物品的消毒；辐射的穿透力强，可直接对密封包装的物品进行消毒。 缺点：由于电离辐射有较强的诱变作用，不适合消毒活的生物材料。 适用于消毒量大和不适做高压或滤过等培养用品。 3.湿热消毒 以高压（103.4kPa）蒸汽灭菌最为常用，是最有效的一种方法。压力蒸汽灭菌器消毒好的物品应注意烘干。 4.干热消毒 电烤箱160℃以上，保持90～120 min，才能杀死细菌芽胞，达到灭菌目的。 适用于玻璃器皿的消毒。 5.过滤除菌 主要用于培养用液的除菌。 ◆ 化学消毒法 采用化学消毒剂消毒那些不能用物理等方法消毒的物品和场地，如无菌室的空气、台面、操作者的皮肤等。 常用化学消毒剂：来苏儿、新洁尔灭、过氧乙酸、70%酒精、乳酸蒸汽等 ◆ 抗生素的应用 主要适用于培养用液的消毒。 消毒灭菌物品 压力蒸汽 干热 过滤 紫外线 化学 化学 电离 抗生素 气体 消毒剂 辐射 培养室、工作台 + + + 玻璃制品 + + + 金属器械 + + + + 塑料用品 + + + 橡胶制品 + + + + 培养用液 + + 布类、棉类 +