1病原性真菌检验 临床微生物学课件.pptVIP

弧菌和弯曲菌 医学检验系临床微生物及免疫学教研室井申荣 第一部分 弧 菌 概 述 弧菌科（Vibrionaseae）包括一群氧化酶阳性、具有端极鞭毛、动力阳性的细菌，有4个菌属，其中，弧菌属是一群氧化酶阳性，发酵葡萄糖，对弧菌抑制剂O/129（二氨基二异丙基喋啶）敏感的细菌。 弧菌属(Vibrio)广泛分布于自然界，尤以水中为多，有100多种。主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血弧菌（致病性嗜盐菌）。前者引起霍乱；后者引起食物中毒。 霍 乱 弧 菌 　　　　霍乱弧菌（V.cholera）是人类霍乱的病原体，霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行，主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水，死亡率甚高。属于国际检疫的烈性传染病。 霍乱弧菌包括两个生物型：古典生物型（Classical biotype）和埃尔托生物型（EL-Tor bio-type）。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外，形态和免疫学性基本相同，在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来，全球共发生了七次世界性大流行，前六次病原是古典型霍乱弧菌，第七次病原是埃尔托型所致。 　1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株（0139），它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同，但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。该菌株在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长，因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。 一、生物学性状（一）形态染色 霍乱弧菌呈弧形或逗点形态，大小为1.4~2.6×0.5~0.8μm。革兰氏阴性菌，菌体一端有单根鞭毛和菌毛，无荚膜与芽胞。 取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察，可见细菌运动极为活泼，呈流星穿梭运动。 （二）培养特性 霍乱弧菌为需氧或兼性厌氧菌; 营养要求不高，耐碱不耐酸，在pH8.8～9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一pH不易生长，故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基; 在碱性平板上菌落直径为2mm，圆形，光滑，透明。 常用的选择培养基为硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖琼脂平板（TCBS），霍乱弧菌在其中可形成较大的菌落，因发酵蔗糖产酸而使菌落呈黄色。 （三）生化反应 两个生物型的霍乱弧菌都能分解甘露醇、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖，产酸不产气。迟缓发酵乳糖，不分解阿拉伯糖。 氧化酶、明胶酶试验均阳性。 能产生靛基质，霍乱红反应阳性 El Tor型霍乱弧菌与古典型霍乱弧菌生化反应有所不同 El Tor型V－P试验为阳性，能产生强烈的溶血素，溶解羊红细胞，在血平板上生长的菌落周围出现明显的透明溶血环， 古典型试验V－P试验为阴性，不溶解羊红细胞。 个别EL Tor型霍乱弧菌株亦不溶血。 2．分群和分型： 根据O抗原的特异性，可将霍乱弧菌分成139个血清群。 根据是否与O1抗血清凝集分两大群， 凡能与O1群抗血清发生凝集的称为O1群霍乱弧菌； 凡不被O1群抗血清凝集的其它血清群统称为非O1群霍乱弧菌。 生物型：O1群霍乱弧菌有古典生物型和E1 Tor 生物型之分，两个生物型具有相同的血清型。我国流行以El Tor、小川型霍乱弧菌为主。 噬菌体分型： 对噬菌体的敏感性进行分型，其中较为实用的是第Ⅳ组和第Ⅴ组噬菌体。 （五）变异性： （六）抵抗力 霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，EL-Tor生物型抵抗力较强。 霍乱弧菌对热、干燥、日光、化学消毒剂和酸均很敏感，耐低温，耐碱而不耐酸。 霍乱弧菌对链霉素、氯霉素和四环素敏感，但El Tor生物型对一定浓度的多粘菌素B及庆大霉素有耐药性。 二、致病性和免疫性1．致病物质 （1） 鞭毛、菌毛、粘液素酶 （2） 霍乱肠毒素（cholera enterotoxin） 霍乱肠毒素本质是蛋白质，不耐热。对蛋白酶敏感而对胰蛋白酶抵抗。 该毒素属外毒素，具有很强的抗原性。 致病机理 2．所致疾病 引起烈性肠道传染病的霍乱，为我国的法定传染病（甲类），表现为剧烈的上吐下泻，导致严重的脱水、酸中毒、痉挛、尿闭、休克和死亡。 人类在自然情况下是霍乱弧菌的唯一易感者，主要通过污染的水源或饮食物经口传染（粪口途径）。患者出现上吐下泻，泻出物呈“米泔水样”，并含大量弧菌，此为本病典型的特征。 3．免疫性 患过霍乱的人可获得牢固的免疫力，再感染者少见。 病后小肠内可出现分泌型lgA。 三、微生物学诊断 由于霍乱流行迅速，且在流行期间发病率及死亡率均高，危害极大，因此早期迅速和正确的诊断，对治疗和预防本病的蔓延有重大意义。 （一）标本采集： 标本以粪便为主， 一般米泔水样便采取1－3ml，成形便采取蚕豆大小。 在某些情况下，亦可采取呕吐物和