实验四 硅胶薄层层析.ppt

实验四 硅胶薄层层析 掌握薄层硬板的制备方法。 掌握薄层色谱的一般操作方法。 了解薄层色谱在中药分析中的应用。 仪器与试剂 双槽层析缸 玻璃板10＊20 cm（厚3mm） 毛细管0.5mm 研钵 电吹风 天平（0.1mg） 硅胶G（薄层层析用） 生药当归、丹参 层开剂：正已烷：乙酸乙酯（９：１）２０ｍｌ 硅胶G薄层板的制备： 称取硅胶G 10g和0.5%的羧甲基纤维素钠溶液30ml在研钵中向一方向研磨混匀，去除表面的气泡后，在玻璃板上平稳移动进行涂布铺好后于室温下，置水平台上晾干，在反射光和透射光下检视，表面应均匀，平整，无麻点，无气泡，无损坏及污染，于110℃烘30min,冷却后立即使用或置于干燥箱中备用。 注意：两人做三块薄层板！！ 画展开后的层析图．并记算各斑点的Rf值． 思考题 1.影响吸附薄层色谱Rf值的因素有哪些？ 2.薄层板的主要显色方法有哪些？ * * 目的 硅胶G薄层板的制备 （已完成） 样品的制备 当归、丹参各2g，分别加10ml乙醇，置于50ml锥形瓶中．超声振荡10分钟，取上清液． 点样 用毛细管吸取上述二种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上。 1.点样一般为圆点，点样基线距底边２cm 2.点样直径一般不大于2mm 3.点间距离大于0.8cm 4.点样时必须注意勿损伤薄层表面。 展开 点好样的薄层板放入展开缸的展开剂中，以正已烷：乙酸乙酯（9:1）20ml为展开剂，浸入展开剂的深度为距原点5mm为宜，密封，待展开至6-8cm,取出薄层板，晾干，用电吹风热风吹薄层板，至有斑点出现 观察 记录 日光下 紫外分析仪 点样 层析 7cm 2cm Rf值＝ 斑点到原点的距离 原点到溶剂前沿的距离