01孙娟娟-微生物的生长规律.pptVIP

一 、微生物的个体生长 二 、单细胞的典型生长曲线 三、 微生物的连续培养 四 、微生物的高密度培养 一 微生物的个体生长和同步生长 1 同步培养 设法使某一群体中的所有个体细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂周期中，然后通过分析此群体在各阶段的生物化学特性变化，来间接了解单个细胞的相应变化规侓。 2 同步生长 通过同步培养的手段而使细胞群体中各个体处于分裂步调一致的生长状态。 3 微生物同步生长的方法： 环境条件诱 机械筛选法 各个时期细胞分离的方法 机械筛选法 过滤法 密度梯度离心法 膜洗脱法 各个时期细胞分离的方法 M：分裂期 S：分裂间期 G1：分列后期 G：2分列前期 M、秋水仙素或秋水酰胺 S、TDR双阻断法 G1 、去除异亮氨酸制造恶环境 G2 密度梯度离心法 二 单细胞微生物的典型生长曲线 生长曲线 定量描述液体培养基中微生物群体生长规侓的实验曲线 典型生长曲线 以细胞数目的对数值作纵坐标，以培养时间作横坐标 包括延滞期、指数期、稳定期、衰亡期） 停滞期： 　　（1）细胞物质开始增加； 　　（2）有的细胞开始不适应环境而死亡； 　　（3）细菌总数下降； 　　（4）停滞期末期，细胞代谢活动能力强，细胞中RNA含量高，嗜碱性强。对不良环境条件较敏感，呼吸速度、核酸及蛋白质的合成速度接近对数细胞，并开始细胞分裂 影响停滞期长短的因素 菌种：不菌军种停滞期时间不同 菌龄：对数生长期的菌种接种，子代停滞期短；稳定期的菌种接种，子代停滞期居中；停滞期或衰亡期菌种接种，子代停滞期长。 接种量：接种量大，停滞期短，反之则大； 培养条件：培养丰富的天然培养基比营养单调的组合培养基停滞期短。 种子损伤度：接种的细胞被加热、辐射或有毒物质损伤。 对数期 青年 所有细菌均繁殖 细菌数目X增长率倍率的对 数与时间成正比。 故称对数期。 （相当于重量法细菌曲线的增长率上升阶段） 特点 ① 繁殖速度最快 ②平均代时 （繁殖一代的时间）最短 ③细菌的带时于哪些因素有关？ ④种子遗传 、个体健康状况（营养 、环境条件） ⑤对数期代时比其它时期短 ⑥如大肠杆菌在20摄氏度时其代时是35摄氏度条件下的2倍 代时-- --细菌每繁殖一代所需的时间 哪个时期 （迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期）代时最具有种属代表性？为什么？ 最短值→无限长 （休眠） 对数代时－最短值 细菌代时通常指最适条件下的对数期代时 影响代时的因素 细菌种类、营养成分和浓度、温度 伤寒沙门氏菌培养基蛋白胨浓度： 125% G 800分钟； 1% G 40分钟。 大肠杆菌培养温度： 21.5-21.80 摄氏度 G 62.2分钟 37.50 摄氏度 G 17分钟 生长限制因子： 低浓度范围内可影响生长速率和菌体产量的营养物。 稳定期（中年） 出生率 死亡率 死亡原因何在呢？ 营养短缺代谢毒物增 多 （相当于重量变化曲线中的增长率下降阶段） 稳定期的生产意义 生长得率 :单位限制性营养物所能产生出的克菌体干重。 产物合成期:进入稳定期后细菌将初级代谢产物作前体，通过次级代谢途径合成次级代谢产物 稳定期产物）。 稳定期的利用创建了发酵工业的连续培养模式 死亡期 老年） 死亡率 出生率 相当于重量法的内源呼吸阶段） 如何给细菌延年益寿呢？ 补营养、 环保 去除环境毒物） 如果把地球看作是封闭的间歇式培养基，人类看作是细菌，人口若不加控制，必将经历由于资源枯竭，污染物遍地而引发的大灭绝。 自救－节约 、节育防止 “ 营养物消耗过快”，环保防止 “有害代谢物毒性抑制”。 人类群体有类似规侓吗？ 三 、微生物的连续培养 一方面连续进料，另一方面又连续出料。营养物的加入和培养物的产出达到动态平衡，培养的微生物长期保持在指数期的平衡生长生长状态和恒定的生长速率上。 原理:进料 补足营养（”污染物“） 出料 稀释菌浓度 、毒物浓度 它又分为两种：恒浊连续培养、恒化连续培养 1 恒浊连续培养 恒浊－培养基浊度恒定 实质是细菌数量恒定） 细菌处于最高生长速率 较少应用 恒化连续培养 恒化进料营养物总量流速恒定 应用;环境工程、生物工程、实验室研究 细菌生理特性研究、细菌的快速筛选等 。 * *