高温液相色谱（HT-LC）在医药领域中的应用挑战和成就.docVIP

高温液相色谱（HT-LC ）在医药领域中的应用：挑战和成就摘要：在药厂中，建立适合于评价药物活性成分（APIs）和配方药效/ 纯度的分析方法是其分析部门的主要工作。为了识别潜在的杂质，药物实验室采用的分析方法通常是比较缓慢的。然而，对于许多分析如研发、药物代谢、化学过程研究，这些方法都是太慢而不合实际。一种提高液相色谱分析速度的方法是提高温度，本文讨论了升高温度的优势，包括灵敏度改善，选择性变化，以及采用温度梯度同时分析极性和非极性分析物。高温色谱具有许多优点，随着仪器性能的改善，这些方法将具有很好的重现性且能用于论证分析。Abstract：The development of appropriate potency/purity methods for the evaluation of active pharmaceutical ingredients and formulations is a major concern for the analytical departments in the pharmaceutical industry. Many of the traditional LC methods used in pharmaceutical laboratories are slow runs designed to identify any possible impurities. However, for many applications, such as support for colleagues in discovery,metabolite studies, and process research, these methods are too slow to be practical. One way to speed up an LC run is to increase the temperature, and this article discusses the benefits of elevated temperatures, including sensitivity improvements, selectivity changes and simultaneous analysis of polar and nonpolar analytics using temperature gradients. The conclusion is the HT-LC offers many advantages, and the advances in instrumentation allow these methods to be highly reproducible and capable of validation. 1 前言在药厂中，发展适合于评价药物活性成分（APIs）和配方药效/ 纯度的分析方法是其分析实验室的主要工作。许多研究人员通常根据经验来建立相对稳定的液相色谱方法，这些方法也可能用于未来的临床药物检测。研究人员希望采用这些方法将一些药物生产过程中可能产生的杂质及潜在的降解产物与药物活性成分分开。大多数的降解产物和杂质通常具有和药物活性成分相似的结构，分析方法对于选择性的要求具有相当的挑战性。方法发展过程中为了确保所有的峰都能得到分离，常需要采用具有更强保留能力的较长色谱柱和较缓的流动相梯度来分析可能的降解产物。实际上，人们更希望建立等度的药物活性成分的液相色谱分离方法，以减少方法在移植过程所带来的重现性问题。通常的方法是采用150 mm × 4.6 mm 的色谱柱（5μm 或3μm 的填料粒径），在45 min 内完成分析任务。可靠的分析方法能够满足临床药物稳定性评价或质量评价的需求。然而，当需要将杂质分离以便进一步识别时，这些方法的分析时间对于研发（毒性材料的纯度评价）、药物代谢（代谢产物的评价）、化学过程研究（纯度评价用于改进合成过程）、药物研究（赋形剂的兼容及配方开发）甚至是对于一般的实验室分析而言都太长，甚至不合实际。分析时间取决于样品对分析系统的适应性，这也将给那些等待分析验证方法提供数据的部门很难做出决定。因此，探索不增加成本，且能在不损失峰容量和分辨率的条件下提高分析通量的方法具有非常重要的意义。液相色谱分析中提高柱温（ 40 ）的优点已有诸多报道[1,2]。随着温度的升高，流动相的粘度将会降低，从而可以采用更高的流量（甚至可以高达8 mL/min）以达到高通量的分析。同时，由于流动相粘度的降低， 更细粒径的填料（ 3 μm）以及更长的色谱柱甚至多根色谱柱的耦联可以被采用，从而使得一些很难分开的关键色谱峰能够得到基线分离。此外，由于分析物在高温