贝伐单抗治疗穿透性角膜移植术后新生血管对全身的影响.docVIP

贝伐单抗治疗穿透性角膜移植术后新生血管对全身的影响 　　摘要：目的 观察贝伐单抗用于治疗穿透性角膜移植术后新生血管，全身血液中VEGF和免疫功能含量变化。方法 对12例（12眼）穿透性角膜移植术后新生血管增生患眼，球结膜下分别注射贝伐单抗和设立空白对照组，1次/月，共2次。于注药前1d，后1d，1月分别检测血液中VEGF和免疫功能的含量。结果 注射贝伐单抗组角膜新生血管面积明显减小。全身血液中VEGF和免疫功能的含量均无变化。结论 穿透性角膜移植术后球结膜下注射贝伐单抗对全身VEGF含量和免疫功能无影响。 　　关键词：贝伐单抗；穿透性角膜移植；VEGF；免疫功能 　　角膜的免疫赦免使角膜移植成功率高居各器官移植成功率之首，但是角膜移植仍会发生排斥反应，而排斥反应最多见的就是角膜新生血管增生（CNV）。穿透性角膜移植术后角膜新生血管破坏角膜的正常微环境，使眼前房相关免疫偏离（ACAID）消失，免疫反应不被赦免，眼发生迟发型超敏反应。所以，角膜移植术后的角膜排斥反应危险性随角膜新生血管化程度而增加，减少CNV增生从调节ACAID对植片的存活意义重大。研究表明，VEGF是已知促新生血管形成最主要的生长因子之一[1]。尤其在角膜瘢痕组织表达增多[2]。然而目前缺乏一种药物针对VEGF有效控制。通过研究，逐渐认识体液免疫同样很重要的[3]。而体液免疫抗体水平的变化是角膜移植术后排斥反应监测的重要内容，可作为术后早期治疗及保护植片的监测指标。本实验在穿透性角膜移植术后新生血管患者球结膜下注射贝伐单抗用于观察是否能抑制CNV的生长的同时检测血清中VEGF含量及体液免疫功能中IgG、IgA、IgM、C3和C4含量的变化，可了解该药物用于穿透性角膜移植后新生血管的同时是否能对全身VEGF和体液免疫功能有所改变。 　　1 资料和方法 　　1.1一般资料 选择我院自2006～2009年患有角膜白斑，经药物治疗后仍影响患者视力，经行穿透性角膜移植术后3个月，发生角膜排斥反应且新生血管增生达Ⅲ度以上患眼对12例（12眼），其中男7例，女5例，年龄20～68岁，平均38岁。患者均有球结膜混合充血，角膜水肿，患眼异物感，畏光，流泪等症状，部分患者同时合并有植片的排斥反应出现。 　　1.2方法 　　1.2.1所有患者治疗前均排除患有全身性疾病，肝肾功能不全等情况，了解药物治疗风险，充分知情的情况下签有治疗同意书，随机分为两组，每组6例，于每月球结膜下注射药物1次，共2次。A组（对照组）：拒绝药物治疗者设为对照组；B组：贝伐单抗（Bevacizumab）2.5mg（0.1ml）球结膜下注射。注药步骤为同一名医师按眼科常规手术要求消毒后，爱尔卡因滴眼液表面麻醉术眼，1ml空针28号针头抽取药物或注射用水，分别于鼻上，鼻下，颞上，颞下四方位等量均分药物注射。 　　1.2.2 ELASA法测定血清中VEGF的含量 采用ELASA法测定血清中VEGF的含量。分别于注药前1d天，注药后1、7、14、30、60d采集患者静脉血液3ml，经离心后提取血清500μl，于-80℃于贮存，采用上海依科赛生物制品有限公司人VEGF ELASA 试剂盒测定血清VEGF含量。 　　2.2.3检测血液中免疫功能的含量改变 分别于注药前1d，注药后1d，1个月采集患者静脉血液3ml，分别送检测定血液中IGA，IGg，IGM，C3，C4含量。 　　3 结果 　　3.1症状 B组治疗后患者眼部充血，畏光，流泪症状均有减轻，局部角膜新生血管减少，未见角膜炎症反应及分泌物增多等炎症表现。 　　3.2 ELASA法测定血清中VEGF的含量检测，A组与B组之间检查结果经配对t检验无统计学意义（P0.05）。 　　3.3血液中免疫功能指标IgG，IgA，IgM，C3，C4含量检测，A组与B组之间检查结果经配对t检验均无统计学意义（P0.05）。B组之间检查结果经单因素方差分析亦无统计学意义（P0.05）。 　　4 结论 　　正常角膜可以通过免疫屏障来面对外界刺激。在角膜周围存在少量的免疫活性细胞， 而角膜基质层中存在一定浓度的Ig，角膜中的主要的Ig是IgG，其次为IgA，两者的比例为10：1。免疫球蛋白是角膜体液免疫反应的基础。泪液中免疫球蛋白较强的抗体活性决定了其在免疫防御系统中的重要作用。但由于泪液采集和测定方法不同，正常值变异很大，故临床通过监测免疫功能血清含量更为普遍且具有一定意义[4]。研究中采用的药物贝伐单抗（Bevacizumab），又称Avastin，能通过直接作用于血管内皮细胞抗体，阻止VEGF与内皮细胞表面的受体结合，该药具有抑制血管通透性增加，细胞外基质变性，血管内皮细胞迁移等作用[5]从而阻止血管渗漏和新生血管的形成 。Kemt等[6]证明