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实验八:乳脂的测定(罗兹-哥特里法) 1.实验原理 利用氨-乙醇破坏乳的胶体形状及脂肪球膜,使非脂成分溶解于氨-乙醇溶液中,而脂肪游离出来,再用乙醚-石油醚提取出脂肪,蒸馏出去溶剂后,残留物即为乳脂肪。 2.适用范围与特点 本法适用于各种液状乳、各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品,也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。本法为ISO、FAO/WHO等采用,为乳及乳制品脂类定量的国际标准法。 3. 实验材料、仪器与试剂 实验材料:全脂牛乳 仪 器:量筒、移液管、烧杯、恒温水浴锅、烘箱、分析天平。 试 剂:氨水、乙醇、乙醚、石油醚 4. 实验步骤 移取牛奶10mL于量筒中,加入1.25mL氨水,充分混匀,置60℃水浴中加热5min,再振摇2min,加入10mL乙醇,充分摇匀,于冷水中冷却后,加入25mL乙醚,振摇半分钟,加入25mL石油醚,再振摇半分钟,静置30min,待上清液澄清时,读取醚层体积(V),用移液管移出一定体积(V1)醚层于一已恒重的烧杯(m1)中,回收乙醚和石油醚,挥干残余醚后,放入100~105℃烘箱中干燥0.5h,取出放入干燥器中冷却至室温后称重(m2),计算乳脂含量。 5. 结果计算 6. 注意事项 (1)乳类脂肪虽然也属于游离脂肪,但因脂肪球被乳中酪蛋白钙盐包裹,又处于高度分散的胶体分散体系中,故不能直接被乙醚、石油醚提取,需预先用氨水处理,故此法也称为碱性乙醚提取法。 (2)若无抽脂瓶时,可用容积100mL的具塞量筒替用,待分层后读数,用移液管吸出一定量醚层。 (3)加氨水后,要充分摇匀,否则会影响下步醚对脂肪的提取。 (4)操作时加入乙醇的作用是沉淀蛋白质以防止乳化,并溶解醇溶性物质,使其留在水中,避免进入醚层,影响结果。 (5)加入石油醚的作用是降低乙醚极性,使乙醚与水不混溶,只抽提出脂肪,并可使分层清晰。 (6)对已结块的乳粉,用本法测定脂肪,其结果往往偏低。 m2——烧杯和脂肪的质量,g m1——空烧杯的质量,g m——样品的质量,g(ρ牛奶=1.03g/cm3) V——读取醚层总体积,mL V1——取出醚层的体积,mL 脂肪 % = m2-m1 × 100 m× V1 V
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