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大鼠离体心房肌收缩力测定试验
大鼠离体心房肌收缩力测定试验规程
No.
实验室及负责人印章
发布日期 执行日期 编写者 审核者 QAU负责人 修订与更改记录
废除 更改 修订日期 签名或盖章 1 2 3 4 大鼠离体心房肌收缩力测定试验规程
摘要 本SOP规定了本实验室大鼠离体心房肌收缩力测定试验规程
关键词 大鼠,离体心房肌,收缩力
前言 本标准操作程序规定了本实验室大鼠离体心房肌收缩力测定试验规程。本法系给予大鼠心房肌一定电刺激,按累计计量法加样,测定收缩力变化情况,以观察供试品对离体心房肌作用的一种方法。
内容
1 试验动物
品系:SD大鼠
体重:200-250g
性别:雄性
2 给药途径及样品配制
离体组织直接加样
样品按照要求配制到所需的各浓度
3 试验方法
用3%戊巴比妥钠30 mg/kg腹腔注射麻醉大鼠,开胸取心,放入低温(4℃)K-H营养液中冲洗,剪下左心耳。心房肌标本一端用蛙心夹固定于10 ml浴管中,另一端连接力换能器,营养液为K-H液,浴温35 ℃,通入含95%O2+5%CO2的混合气, 标本负荷力1g,平衡45min,每15min更换一次营养液。然后加电场刺激,刺激频率1Hz,波宽0.35ms,逐步提高刺激电压,至心房肌标本起博的电压为阈值电压,调节刺激电压为阈值电压的150%,再平衡15min。实验采用累计剂量法,从1×10-7 到1×10-5 M ,每5min加一次样品,加样方法如下:
浴管中终浓度 加样量(μl) 1×10-7 3×10-7 1×10-6 3×10-6 1×10-5 加入溶液浓度(M) 1×10-4 10 20 70 1×10-3 20 70 配药公式 L ml W/(C×M) L : 配样体积 ml W: 样品重量 mg C : 摩尔浓度 M: 样品分子量
4 观察指标和时间
测定加样前和加样后达到的最大收缩力,根据下式计算收缩力增加值:
Δ收缩力%=(加样后收缩力-加样前收缩力)/加样前收缩力×100%
5 其它
上海医药工业研究院药理评价研究中心 发布日期: 生效日期:
重发布日期: 页码:2/3
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