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抗体工程研究进展 沈倍奋 军事医学科学院基础医学研究所 治疗性抗体的研发阶段 靶标发现 抗体制备 抗体筛选、确认和优化 中试工艺研究 临床前研究 临床研究 主要研究进展 靶抗原的发现 抗体人源化改造及人源抗体制备 提高抗体效应功能 提高抗体表达量 其他 抗体药物的作用机理 直接效应 诱导凋亡 抑制增殖 阻断生长因子或生长因子受体 干扰血管生成 间接效应 依赖补体的细胞毒（CDC） 依赖抗体的细胞毒（ADCC) 作为毒素、放射性同位素和细胞 毒药物的载体 形成抗独特型抗体 通过双特异性抗体靶向效应细胞 提高ADCC和CDC的策略 抗体Fc突变 改变抗体糖基化 移植人免疫球蛋白的小鼠 抗体结构信息具有重要的研究价值 PDBView 抗体结构分析 抗体序列分析 抗体表达分析 抗体分类管理 BLAST 系统日志管理 用户权限管理 Kabat 本地数据库 抗体分类 系统参数设置 系统字典设置 外部数据接口 PDB GENE BANK Swiss-Prot TRRD KABAT 本实验室抗体数据库 抗体分析系统主界面 抗体专家分析系统 Her2靶点人源抗体（HF)的设计与验证 Her2晶体结构 D4 SDS非还原电泳 155KDa HF人源表达抗体的纯化和功能鉴定 HF人源抗体基因合成、构建、表达 人源化抗体设计、虚拟筛选 抗体专家分析系统 抗原抗体复合物结构信息分析 HF人源抗体对Her2+ +细胞的ADCC杀伤效应分析 HF SKVO3 –Her2+++ MCF7 - Her2+ Herceptin SKVO3 –Her2+++ MCF7 - Her2+ HF人源抗体对Her2靶点的特异性识别 新抗体或抗体类似物的设计 以抗原－抗体复合物的晶体结 构设计新抗体 以人抗体Fc为支架设计类抗体 以全人抗体为支架设计小抗体 以非Ig的人蛋白为支架设计功能分子 PT4－Linker－FC融合蛋白的构象 PT4-Linker-FC与TNF-α相互作用复合物的构象 拮抗肽－linker－Fc融合蛋白设计 抗体可变区框架作为支架 VH结构域能够保持一定的刚性； VH在空间上能够将几个短肽展示在一定的区域内； 抗体可变区骨架展示的外源肽段长度可以改变。 CDR3 CDR1 CDR2 FR1 FR2 FR3 FR4 单域抗体（PTVH5）设计 PTVH5与TNF形成的复合物模型 单域抗体 单链抗体(scFv) 单链抗体（TSA1、TSA2）设计 主要研究进展 靶抗原的发现 抗体人源化改造及人源抗体制备 提高抗体效应功能 提高抗体表达量 其他 提高抗体 效应功能 偶联细胞毒物质 双特异性抗体 抗体Fc突变 改变抗体糖基化 细胞内抗体 抗体融合蛋白 抗体偶联细胞毒物质 抗体融合蛋白 双功能抗体作用原理 BsAb BsAb 效应细胞 靶细胞 触发受体 膜表面分子 NK细胞 CD16 肿瘤细胞 HER2/neu 抗HER2/neu×抗CD16 BsAb BsAb 双特异性抗体介导的杀伤作用机制 （a), BsAb桥连效应细胞和靶细胞；(b), 连接的触发分子启动细胞毒反应；(c) , 效应细胞对靶细胞产生致死性杀伤反应。 细胞毒反应 细胞内抗体：在细胞内合成并作用于细胞内组分的抗体 细胞核 EGFR EGFR EGFR 抗体的ADCC和CDC效应 * * 13% 21.7% 52.3% 13% 靶抗原的发现 TRAIL: TNF-related apoptosis-induced ligand TRAILR: DR4、DR5、DcR1、DcR2、OPG Protein extraction and digestion Treated/Sick Control/Healthy Mass Spectrometer Protein peptides identification MS spectra quantification characterizati