地榆中总黄酮超提取工艺的研究-结题报告-修改.doc

地榆中总黄酮超声提取工艺的研究-结题报告 申请人：高爱国 指导教师：程鹏 第一部分：[课题提出的背景及意义] 地榆为蔷薇科植物地榆Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆Sanguisorba officinalis L.var.longifolia (Bert.) Yü et Li 的干燥根。地榆始载于《神农本草经》。味苦、酸，性微寒。有凉血止血、清热解毒、生肌敛疮的功能。用于便血、血痢、痔疮出血、尿血、崩漏、痈肿疮毒、烧伤、烫伤。地榆历史悠久，疗效确切，价格低廉，药源丰富，全国各地均有大量分布。地榆所含成分是三萜及其甙类，黄酮类，鞣质类，糖类等。黄酮类化合物是地榆的有效药理活性成分，本研究拟根据黄酮类化合物的超声波提取，利用正交实验法对超声提取的影响因素进行考察，探索超声提取地榆总黄酮的最佳工艺条件，为进一步开发利用地榆资源提供了一定科学依据。 第二部分：[研究的主要内容和目标] 建立地榆总黄酮超声提取工艺。 第三部分：[研究方法] 采用超声提取，设计正交试验，确定提取工艺的参数；采用大孔吸附树脂纯化地榆总黄酮。 第四部分：[研究工作的组织与实施] 曹纬国老师作为指导，本研究小组讨论提出研究方案，通过预实验确定了地榆中总黄酮的含量，经过修改完善，确定研究方案。 研究的阶段分为实验准备阶段，地榆样品的采集，地榆总黄酮含量测定方法的研究，地榆总黄酮提取工艺的研究，地榆总黄酮纯化工艺的研究四个阶段。 第五部分：[研究结论与成果] 本研究首先确定了地榆总黄酮的含量测定方法，然后根据黄酮类化合物的提取规律，采用有机溶剂提取法，建立地榆中总黄酮的提取工艺，并应用大孔树脂对地榆总黄酮的分离纯化工艺进行研究，建立系统的地榆总黄酮的提取分离工艺。该工艺稳定可靠，具有一定的应用价值，可用于地榆资源的开发。 第六部分：[质量与效果分析] 对研究结果进行分析：通过合理的实验设计，正确的实验操作，根据黄酮类化合物的提取规律，采用有机溶剂提取法，建立地榆中总黄酮的提取工艺，并应用大孔树脂对地榆总黄酮的分离纯化工艺进行研究，建立系统的地榆总黄酮的提取分离工艺，基本完成研究目标；为地榆资源的开发利用提供了基本数据。 研究的自我评价：地榆为蔷薇科植物地榆Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆Sanguisorba officinalis L.var.longifolia (Bert.) Yü et Li 的干燥根。有凉血止血、清热解毒、生肌敛疮的功能。地榆始载于《神农本草经》。地榆历史悠久，疗效确切，价格低廉，药源丰富，全国各地均有大量分布。据文献报道 第七部分：[进一步要研究的问题] 已知地榆根总黄酮中含有山奈素-3,7-二鼠李糖甙，槲皮素-3-半乳糖-7-葡萄糖甙。茎，叶，花中已分离出山奈素，槲皮素，矢车菊甙，矢车菊双甙，杨梅甙，花青甙，无色花青甙，黄酮醇以及儿茶素等。但是各类成分的比例不清楚，地榆茎，叶，花中总黄酮的提取纯化工艺尚需进一步研究。 附：研究论文或实验报告等。 1. 器材与实验方法 1.1材料与试剂 地榆购自重庆中药材市场，粉碎后过 60目筛后，密封置阴暗处冷冻保存；芦丁标准品购自中检所；其他试剂如乙醇、乙酸乙酯、NaNO2、Al（NO3）3、2mL,分别置于 25mL 容量瓶中,加 50%乙醇 8mL,加 5%亚硝酸钠溶液 1mL,摇匀,放置 6min 后加 10%硝酸铝溶液 1mL, 摇匀, 放置 6min后再加入氢氧化钠试液 10mL,加蒸馏水至刻度,摇匀。放置 15 min后,在 190～800nm波长范围内进行扫描。结果,对照品溶液与供试品溶液在503nm处均有较强吸收,选择测定波长为 503nm。 1. 3. 2 标准曲线的绘制　 精密称取 P2O5干燥 24h的芦丁对照品 9.00mg,置 50mL容量瓶中,加入 95%乙醇 40mL, 置温水中加热使溶解, 放冷, 加 95%乙醇定容,摇匀,即得 0.18mg/ml对照品溶液。精密吸取对照品溶液 1、2、4、6、8mL, 置 25mL容量瓶中,按“1. 2. 1”项方法显色,测定吸光度。以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标绘制标准曲线: y = 16.07385x - 0.01107, R = 0. 99988线性范围为 16.06278～128.57873 mg/ml。 1. 3. 3 地榆总黄酮的提取　 将地榆药材粉碎过 60目筛,精密称取地榆粉末 2g,加入一定量的乙醇溶液,超声提取,提取液抽滤后减压回收成浸膏,加 50mL水溶解,全部移入分液漏斗中,用乙酸乙酯萃取至无色,合并后减压蒸干,残渣用 95%乙醇溶解并定容到 500mL容量瓶中,即得样品溶液。精密吸取 2mL 样品溶液置于 25mL 容量瓶中,按