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植物体细胞杂交过程: 灭活病毒诱导细胞融合的原理: 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用,使细胞互相凝聚,细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布,细胞膜打开,细胞发生融合。 灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但并不破坏这些病原体的抗原结构。 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 杂交瘤细胞有何特点?本过程利用的哪些技术? 2.3单克隆抗体的应用 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 ( ) A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点( ) 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是( ) A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 【例4】科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合,得到杂交细胞,经培养可产生大量的单克隆抗体,与骨髓瘤细胞融合的是( ) A.经过免疫的B淋巴细胞 C.经过免疫的T淋巴细胞 B.不经过免疫的T淋巴细胞 D.不经过免疫的B淋巴细胞 【例5】单克隆抗体是由下列哪种细胞产生的 ( ) B淋巴细胞 B.T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞 D.杂交瘤细胞 【例6】用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是( ) A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞 B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体 * * * 蛇身 马首 鹿角 兽脚 鹰爪 鱼鳞 虎须 鬣尾 (lie) 植物细胞A 植物细胞B 去除细胞壁 去除细胞壁 原生质体A 原生质体B 诱导融合 融合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂(脱分化) 分化发育(再分化) 愈伤组织 杂种植株 原生质体的制备 原生质体的融合 筛选 组织培养 1、如果让动物细胞进行融合/杂交,应注意动、植物之间的哪些区别? 无细胞壁 全能性受限制,不能发育成杂种动物 动物细胞融合与植物细胞杂交的不同: 无需去除细胞壁 不能培养成新的动物个体 细胞融合是正常的生命活动 两个细胞正在融合 受精作用 A细胞 B细胞 人工诱导 1.1动物细胞融合的概念 杂交细胞 动物细胞融合(也称细胞杂交):是指两个或多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。 一、动物细胞融合 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂,形成完整的杂交细胞 诱导的手段? 融合后细胞的类型? AB杂种细胞遗传物质 有什么特点? 三种AA、AB、BB(A、B) 含两种生物的遗传物质 1.2动物细胞融合过程 原理? 1.2动物细胞融合过程 为什么灭活的病毒能作诱导剂? 灭活丧失感染性 保留融合活性 P52生物技术资料卡 意义: 突破了有性杂交方法的局限,使远缘杂交(种间、属间、科间、动植物之间)成为可能。 这一项技术成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 应用: 最重要的用途是: 制备单克隆抗体 制备单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒(P52) 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 诱导方法 使细胞分散后诱导细胞融合 去处细胞壁后诱导原生质体融合 细胞融合的方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 小结:一、动物细胞融合(细胞杂交) 1.概念: 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2.结果: 形成含有2或多个细胞遗传物质的单核杂交细胞 3.融合原理: 细胞膜的流动性 4.诱导方式 物理法:离心、振动、电激 化学法:聚乙二醇(PEG) 生物法:灭活的病毒 5.意义: 突破有性杂交局限,使远缘杂交成为可能 广泛应用多个领域 重要用途:制备单克隆抗体 强调:效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞,下文将其简称为B淋巴细胞 抗体:能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。 能产生抗体的细胞是浆细胞(即效应B细胞)。 二、单克隆抗体 B淋巴细胞 效应B淋巴细胞(浆细胞) 记忆B淋巴细胞 分化 抗体的传统生产方法: 从血清中分离抗体 该法制备抗体的特点(缺陷): 产量低、纯度低,且抗体的特异性差、灵敏度低。 多种效应B细胞 动物体内
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