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医学超微结构学概述 一、概念 3、显微结构(microscopic structure)是指在分辨本领约为0.2微米的光学显微镜下所能观察到的细胞结构,如核仁、线粒体、中心体等 5、超微结构学(ultrastructure, fine structure)是指细胞或组织在分子水平或亚显微水平的结构,即指在电子显微镜下显示的结构。电子显微镜能观察的范围很广,从细胞内的各种细胞器,细胞的表面结构和各种细胞连接,及细菌(含纳米细菌)、支原体和病毒等各种病原微生物,甚至能看到分子结构(如DNA的结构), 以及原子结构(如已见到钨的原子结构)。 “医学超微结构学”是一门交叉性的基础学科,它主要讲述:①正常人体组织、细胞及与医学实验相关的动物细胞在电镜下的超微结构,即各种细胞、细胞器、细胞核和膜结构,细胞表面结构及细胞连接等;②细菌、支原体、衣原体、霉菌、病毒、寄生虫等病原微生物的超微结构;③核酸、脂质体等生物大分子及医用纳米材料等的超微结构。 它是为了响应我国医学教学体系改革的需要,是为了适应全球医学教育基本标准而分离出来的一门新学科,是细胞生物学的纵向延伸,在形态上又是组织胚胎学的深入与发展。它是临床医学、预防医学、麻醉学及检验等相关专业必修的基础科目,其任务是使学生掌握正常组织与细胞的超微结构,掌握细菌、病毒等的超微形态与鉴定,了解电子显微镜(简称:电镜)在生物医学中的应用及其生物样品的制备技术,了解基于电镜技术的超微病理学在基础研究与临床诊断中的广泛应用,了解超微结构学的新知识和新技术。 二、超微结构学的主要内容 1、主要:人体细胞及与医学实验相关的动物细胞在电镜下的超微结构,各种细胞器和膜结构,细胞的表面结构及细胞连接,也介绍细胞基质的超微结构,细菌、支原体、衣原体、霉菌、病毒等病原微生物和寄生虫的超微结构,以及与医学有关的纳米材料的超微结构等内容 高速运行的电子的波长比可见光的波长短(波粒二象性), 电子显微镜的分辨率(约0.1纳米)远高于光学显微镜的分辨率(约200纳米, 光学显微镜的分辨率受其使用波长的限制). 1931年Ruska与Knoll正式发表论文,研制出第一台电子显微镜。Ruska对电镜术的贡献在于他设计了电磁透镜,今日的电镜即沿用此设计。1986年Ruska获诺贝尔奖金的物理奖 1932年,经过鲁斯卡的改进,电子显微镜的分辨能力达到了50纳米,约为当时光学显微镜分辨本领的十倍,突破了光学显微镜分辨极限,于是电子显微镜开始受到人们的重视。 到了二十世纪40年代,美国的希尔用消像散器补偿电子透镜的旋转不对称性,使电子显微镜的分辨本领有了新的突破,逐步达到了现代水平。 中国,1958年研制成功透射式电子显微镜,其分辨本领为3纳米,1979年又制成分辨本领为0.3纳米的大型电子显微镜。 4、透射电镜的基本原理 镜筒 4、电镜技术 1、超薄切片技术 2、负染色技术 3、冰冻复型技术 4、冷冻超薄切片技术 5、电镜酶细胞化学技术 6、免疫电子显微镜技术 7、电镜放射自显影技术 8、核酸大分子的电镜样品制备技术 9、SEM电镜样品制备技术 10、电子微探针 :TEM或SEM与X射线衍射仪或电子能谱仪相结合 电子显微镜(简称:电镜)的问世为人类探索微观世界的奥妙开辟了新纪元。一个多世纪以来,电镜技术的飞跃发展,电镜制样技术的不断创新,使电镜的应用日益广泛,涉及到工业、农业、地质、医学及生物学等的各个领域。电镜在医学上的应用,早在40年代已经开始,在病毒学、细胞生物学、组织学、病理学、分子生物学及分子病理学等研究领域均作出了卓越的贡献。近20年来,电镜从医学理论性的研究逐渐扩大到临床医学的实际应用方面。例如:对疾病的病情、病因的鉴定;对肿瘤、血液病及肾脏病等的分型诊断方面都取得了显著成效。 我们正处在医学飞速发展的新时代,人们对疾病的认识水平不断提高,新的诊疗手段不断涌现,广大医务工作者及医学生迫切需要这方面的知识,以便更好地开展医学科研工作及临床诊断。 五、电镜及其技术在医学中的应用 ①在基础医学方面 a.观察细胞的亚微结构:线粒体、内质网、高尔基体、溶酶体等细胞器的接构及病理变化。 b.观察药物的代谢机理及对亚微结构的影响。 c. 研究病毒的作用机理及作用靶。 d.探讨分子病理学的发生机制。 e.研究大分子在生理和病理条件下的作用方式。 f.其它:如功能蛋白质组的亚细胞定位,纳米药物的研制等 七、超微结构观察与研究中值得注意的问题 1 、局部与整体的关系: EM下:极小的一部分,超薄切片获得的样品厚度只有一个细胞的几百分之一……必须同时进行大体和组织学的观察,才能获得全面的资料. 2 、静态和动态的关系:在
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