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复习动物细胞工程快速复习题 * 1.动物细胞工程的基础是什么? 2.动物细胞培养的基本原理是什么? 3.动物细胞培养液的主要成分是什么? 4.进行动物细胞培养的材料一般有何特点? 动物细胞培养技术 离体的细胞在适宜的条件下可以增殖 通常含有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、动物血清等。 一般取胚胎组织或幼龄动物的组织做动物细胞培养。因为胚胎组织或幼龄动物的组织的细胞生命力旺盛,分裂能力强。 5.原代培养与传代培养有何区别 ? 6.动物体细胞培养技术能将一个分化的体细胞培养成为一个动物体吗?为什么? 7.为什么要将组织分散成了单个细胞再进行培养? 将动物组织消化后的初次培养就是原代培养。 当原代培养的细胞贴满瓶壁后,用胰蛋白酶处理,制成细胞悬浮液后再次分瓶继续培养就是传代培养。 不能 ①单个细胞容易和周围环境进行物质交换——获得营养物质、氧气等,排出代谢废物; ②分散成单个细胞培养能使细胞水平操作的其他技术得以实现 。 动物组织 单个细胞 细胞悬液 贴壁生长 分瓶培养 10代细胞 50代细胞 不死细胞 原代培养 传代培养 胰蛋白酶 剪碎 加培养液 接触抑制 少数癌变 少数 动物细胞培养技术流程 畸形分化 8.怎样将动物组织分散成单个的细胞? 9.胰蛋白酶的作用是什么呢?细胞间隙主要含有什么物质成份? 10.为何要定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来? 11.细胞贴壁生长对培养容器有何要求? 用剪刀剪碎组织,再用胰蛋白酶处理。 胰蛋白酶将动物组织细胞间隙中的蛋白质分解,使细胞分散开。 当贴壁细胞生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。 培养瓶的内表面要光滑、无毒、易于贴附。 12.哪些细胞会失去接触抑制? 13.在体外培养动物细胞需要什么物质和环境条件? 14.动物细胞培养有何应用价值? 肿瘤细胞 无菌无毒环境、充足营养(血清或血浆)、适宜温度、PH、气体环境 (O2和CO2,C02的主要作用是维持培养液的PH)。 ①.大规模生产生物制品,如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体等; ②.药性、毒性检测; ③.培养基因工程中的受体细胞 15.为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清? 16.动物细胞培养要经过脱分化的过程吗?为什么 血清中含有蛋白质、氨基酸、葡萄糖、激素等,其中必需氨基酸动物细胞本身不能合成,必须由培养液提供。 血清激素有胰岛素、生长激素等以及多种生长因子,能促进细胞的生长、增殖和贴附。 不需要。 因高度分化的动物细胞发育潜能变窄,失去了发育成完整个体的能力,所以,动物细胞也就没有类似植物组织或细胞培养时的脱分化过程了。 动物组织块 细胞悬液 原代培养 传代培养 胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞 幼龄动物的器官组织;动物胚胎 动物细胞培养过程 细胞贴壁 接触抑制 原代培养 传代培养 加入培养液 用胰蛋白酶等处理贴壁细胞 适宜条件 不死性细胞 17.什么是动物细胞核移植? 18.多莉羊的诞生在生物学发展史上有何意义? 19.为什么用于核移植的供体细胞一般都选用传代 10代以内的细胞? 将动物的一个细胞核,移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中,使其重组并发育成为一个新的胚胎,新的胚胎最终发育为动物个体(克隆动物)。 说明已经分化的动物体细胞核,仍然具有全能性,在合适的条件下,仍然可以发育成新的个体。 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 培养的动物细胞一般当传代至10~50代左右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞遗传物质可能会发生突变。 20.体细胞核移植获得高产奶牛过程中,利用了哪些现代生物技术手段? 21.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗? 22.体细胞核移植技术有哪些应用前景? 动物细胞培养技术、亚显微操作技术、核移植技术、胚胎移植技术、细胞融合技术 否。绝大部分DNA来自于供体细胞核,但其核外还有少量的DNA,即线粒体中的DNA是来自于受体卵母细胞。 ⑴加速家畜遗传改良的进程 ⑵保护濒危物种 ⑶生产医用蛋白质及组织器官的移植 ⑷了解胚胎发育和衰老过程;追踪研究疾病的发展过程和治疗疾病 卵细胞 A母绵羊 B母绵羊 乳腺细胞 细胞质 细胞核 细胞核移植 早期胚胎 卵裂 C母绵羊子宫(代孕母体) 胚胎移植 多莉羊 分娩 妊娠 多莉羊的培育过程 重组细胞 23.体细胞核移植技术还存在什么问题? 成功率非常低; 绝大多数克隆动物还存在健康问题 24.什么是克隆?生物克隆需要哪3个基本条件?
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