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一、动物细胞融合 1、动物细胞融合的过程 思考题 2、动物细胞融合能利用上述两类方 法吗?还有其他方法吗 思考题 2、动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交,是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞(单核的杂交细胞)的过程。 4、动物细胞融合的应用 4、将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合,可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体,其依据是 A.B淋巴细胞可以产生抗体,但不能无限增殖 B.B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产 生抗体C.骨随瘤细胞可以无限增殖,但不能产生抗 体 D.骨髓瘤细胞可以产生抗体,但不能无限增 殖 5、右图为某同学根据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答: ⑴该方案能达到预期效果吗? 原因是 ⑵图中②为 过程,可在 诱导下完成。杂交瘤细胞繁殖进行的是 分裂,该细胞的特点是 ⑶淋巴细胞能与骨髓瘤融合成一个细胞,两种细胞膜也能融合在一起,说明细胞膜 ⑷将诱导后产生的多种细胞,放在含 培养基的多孔培养板上培养,筛选。 ⑸该方案的目的是 。 单克隆抗体的准确定义为 。 A.一类特殊抗体 B.无性繁殖系 C.单一抗体细胞的无性繁殖系 D.单一抗体细胞的有性繁殖系 ⑹单克隆抗体与一般的血清抗体相比,具有的优点 是 。 思考与探究 2.制备单克隆抗体时,为什么要选用B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞? 1、从母羊甲的体细胞中取出细胞核,注入到母羊乙去掉核的卵细胞中,融合后的细胞经卵裂形成早期胚胎,再植入到另一只母羊丙的子宫内,出生小羊的大多数性状 A.难以预测 B.像甲 C.像乙 D.像丙 2.(2004年,全国)用动物细胞工程技术获取单克隆抗体,下列实验步骤中错误的是( ) A.将抗原注入小鼠体内,获得能产生抗体的B淋巴细胞 B.用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞 C.用聚乙二醇作诱导剂,促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 D.筛选杂交资金积累细胞,并从中选出能产生所需抗体的细胞群,培养后提取单克隆抗体 3.动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中,正确的是 ( ) ①诱导融合的方法完全相同 ②所用的技术手段不相同 ③所采用的原理完全相同 ④都能形成杂种细胞 A.①② B.①③ C.②④ D.③④ 4. 单克隆抗体制备过程中,骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后,要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞,在这种培养基上不能存活增殖的细胞是( ) ①淋巴细胞 ②小鼠骨髓瘤细胞 ③B淋巴细胞自身融合细胞 ④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞 ⑤杂交瘤细胞 A. ②④ B.①③⑤ C. ①②③④ D.②③ 抗原 动物体内 刺激 浆细胞 抗体 抗原不纯 抗体不纯 不能增殖产生大量抗体 二、单克隆抗体 产量低、纯度低,抗体特异性差 3.此方法得到的抗体的缺点是什么? 该法制备抗体的特点: 1、如何保证抗体的纯度? 如何获得化学性质单一、特异性强的高产抗体? (一)、单克隆抗体的制备 设计方案: 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖 2、如何提高抗体的产量? 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 杂种细胞 小鼠骨髓瘤细胞--能无限增殖 一个B淋巴细胞--只分泌一种特异性抗体 B B-B B-瘤 瘤-瘤 瘤 3、细胞融合后培养液中有几种细胞? 4、如何从中筛选出杂交瘤细胞? 用特定的选择性培养基进行筛选: 在培养液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞 5、如何选择出分泌所需专一抗体的杂交瘤细胞? 克隆化培养和抗体检测。经多次筛选,获得足够数量的能分泌所需专一抗体的细胞。 体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖, 从细胞培养液或小鼠腹水中,可提取大量 的单克隆抗体。 6、如何获得大量单克隆抗体? 总结: 单克隆抗体的制备过程 分组讨论,单抗制备过程分哪几步?请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程步骤的图解的字母按正确顺序连接起来。顺序是? (一)、单克隆抗体的制备 诱导其融合的方法有哪些? 融合后培养液中有几种细胞 怎样筛选出杂交瘤细胞,杂交瘤细胞有何优点 注射特定抗原的目的是什么 为何要进行克隆化培养和专一抗体检测,多次筛选 大量增殖杂交瘤细胞获得单克隆抗体的方法 制备过程 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 最主要的优点: 特异性强、灵敏度高并可能大量制备。 ①在基础理论研究中具有重要意义 ② (二)、单克隆抗体的应用 诊断试剂——最广泛应用 准确、高效、简易、快速 同位素标记的单克隆抗体,在特定组织中成像,定位诊断相关疾病 运载药物 “生物导弹” —单抗导向,药物为弹头 ③用于治疗疾病和运载药物 比较植物体细胞杂交
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