人教版教学单克隆抗体的制备课件.pptVIP

（1）为什么用小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合？ 7．右图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。据图回答：　　（1）该方案能达到预期效果吗？　　。原因是 。　（2）图中②为　　　过程，常用　　　　作为诱导剂。该细胞继承了 ，因此不仅能分泌 ，还有 本领。（3）该方案的目的是　　。 * 请同学们在课本P32页上找出： 1.细胞融合的概念 2.诱导动物细胞融合的方法 3.意义 并用笔画出来 2.2.2 动物细胞融合与单克隆抗体 2.动物细胞融合过程： 诱导 细胞膜穿通 细胞膜融合 细胞核融合，形成单核杂种细胞 动物细胞融合 杂种细胞 愈伤组织 杂种植株 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 植物体细胞杂交 去壁 原生质体融合 植物组织培养 物理法 化学法 生物法： 灭活的病毒 动物细胞A 动物细胞B 杂种细胞 常用方法 4、原理 膜的流动性 5、最有价值的应用 制备单克隆抗体 3、过程 不同DNA的两个细胞 灭活的病毒 PEG 杂交细胞 细胞融合完成的标志:细胞核融合成一个核 主要用于制备 单克隆抗体 获得杂种植株 用途 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 使细胞分散后诱 导细胞融合 去除细胞壁后诱 导原生质体融合 细胞融合的方法 膜的流动性 膜的流动性、 植物细胞全能性 原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 ４、植物、动物细胞融合的比较 1.能使动物细胞融合的特有的诱导方法是 A．离心 B．灭活的病毒 C．电刺激 D．振动 B 2.动物细胞融合的目的中最重要的是 A．克服远源杂交不亲和 B．制备单克隆抗体 C．培育新物种 D．生产杂种细胞 B 原始的方法获得抗体，特异性差，纯度低。 想获得单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，通过克隆形成细胞群。 问题：体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增值的，如何使单个淋巴细胞增殖呢？ 单克隆抗体的制备 设计方案： 一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体 小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖 杂种细胞 1、单克隆抗体制备过程 注射 抗原 效应B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选，继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 诱导其融合的方法有哪些？ 思考： 因为B淋巴细胞具有分泌特异性抗体的能力，而骨髓瘤细胞具有在体外培养条件下大量增殖的本领，所以由某种B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞，能够在体外大量繁殖，并且产生特定的单克隆抗体。 （2）单克隆抗体制备过程中应用哪些细胞 工程技术手段？ 动物细胞融合技术 动物细胞培养技术 ？ ？ 抗原 效应 B细胞 筛选 筛选 AA型、BB 型 A 型B型 AB型杂交瘤细胞 能产生所需抗体的细胞 杂交瘤细胞 （3）制备过程为何要经过两次筛选？ 既能无限增殖，又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 杂交瘤细胞 目标 抗原—抗体的特异性结合 在选择性培养基中添加某种药物，特异性杀死骨髓瘤细胞和骨髓瘤细胞自身融合的细胞 原理 第二次筛选 第一次筛选 比较项目 【堂堂清】 1.单克隆抗体的优点是________________________________ 特异性强、灵敏度高、可大量制备 2.单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的原因是 _________________________________ 每一种B淋巴细胞只能分泌一种特异性抗体 3.产生抗体的细胞是_______________ 产生单克隆抗体的细胞是__________ 效应B细胞（浆细胞） 杂交瘤细胞 4.杂交瘤细胞的特点: _______________________________ 既能无限增殖，又能分泌特异性抗体 5.首次筛选是为了获得_____________ 第二次筛选时为了获得 _______________________________ 杂交瘤细胞 既能无限增殖，又能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞 第一步：从一只小鼠体内提取T淋巴细胞，然后与骨髓瘤细胞诱导融合。 第二步：再用普通培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死去。 第三步：对上述经选择性培养的杂交瘤细胞直接在体外条件下做大规模培养，这样从细胞培养液中就可以提出破伤风杆菌单克隆抗体。 1、已注入过灭活破伤风杆菌的小鼠 2、B淋巴细胞 3、选择培养基 4、必须经过专一抗体阳性检验 下面是某同学根据单克隆抗体技术的方法，设计的生产破伤风杆菌抗体的实验方案。指出不足之处。 单克隆抗体在诊断的应用上，具有准确、高效、简易、快速的优点 1、作为诊断试剂 2、用