4.实验四__浮游植物采集和定量研究.ppt

实验四 浮游植物采集和定量 一、实验目的： 1.掌握浮游植物采集、浓缩的常用方法； 2.了解浮游植物计数框的结构；学习、掌握浮游植物计数的方法。 二、实验原理： 应用显微镜的成像原理，并借助浮游植物计数框，计算单位体积浮游植物的数量。 三、实验仪器、用品 广口瓶、乳胶管（医用输液管）、浮游生物网、量筒、鲁哥氏液（碘液）、甲醛、标签纸。 光学显微镜、100μl移液枪 、浮游植物计数框 调查工具 1、采水器 2. 浮游生物网 3、透明度盘 4、广口瓶（标本瓶） 4.浮游植物定量： 5.浮游动物定量： 四、实验内容 ： 1.采样点的选择。 海洋采样点的选择应与环境监测站相一致，或根据污染、赤潮发生范围等确定采样点。2.采样层次、采水量及采样次数。 水深15m以内的浅海，采表（水下0.5m）、底两层；水深大于15m，采表、中、底（距底0.5m）三层。 可分层采水，也可以各层采水等量混合采得1000 ml水样后装入广口塑料瓶，应立即加入10-15 ml碘液（即鲁哥氏液）固定。每一瓶都应有标签标明时间、地点、站号、样品号、采水量、水层、温度等。 采样次数：可以每月一次，一般每季度采样一次，最少要春季和夏末秋初各采一次。 鲁哥氏液配置方法：将6克碘化钾溶于20 ml水中，待其完全溶解后，加入4克碘充分摇动，待碘全部溶解后定容到100 ml。固定浓度为1L水样加10-15 ml鲁哥试剂。 四、实验内容 ： 3.定量样品沉淀与浓缩 所采水样摇匀后倒入沉淀器中静置，使浮游植物完全沉淀。沉淀是一种圆柱形分液漏斗。如无沉淀器也可用量筒、烧杯或在原水样瓶中静置沉淀。 静置沉淀24-48 h后。再用乳胶管或橡皮管（医用输液管）利用虹吸原理小心地抽出上部不含藻类的清液。一般约剩下20-40 ml沉淀物转入30或50 ml的定量瓶中，用上述清液冲洗沉淀器2-3次，洗液仍倒入定量瓶中使水量恰好达到30或50 ml。然后贴上标签，标签上要记载采集时间、地点、采水量、站号、样品号、水层和温度。 四、实验内容 ： 3.沉淀与浓缩 虹吸动作要十分仔细、小心。开始时虹吸管一端放在沉淀器内约三分之二处，另一端套接在已经用手挤压出空气的橡皮球上，然后轻轻松手并移开橡皮球使清液流出，为了避免漂浮水面的一些微小藻类进入虹吸管而被吸走，管口应始终低于水面。虹吸管内清液的活动不宜过快，可用手指轻捏管壁以控制流量，当吸到原水样的3/5以上时，应使清液一滴一滴地流下。吸出的清液要用一洁净的器皿装盛，以便在浓缩过程在出故障时，可重新倒入沉淀器中浓缩，不必新采水。 4. 浮游植物定性：浮游植物样品采集参照文献 国家环保总局，2002 的方法。定性样品用孔径约0.064 mm的25号浮游生物网在水面下约0.5 m处以适当的速度作“∞”字形来回拖动1～3 min，获得的浓缩样分为两份，一份立即用适量的鲁哥氏液固定，另一份活体样品于24小时内镜检。 5. 计数：计数一定体积内的浮游植物种类和数量 显微镜计数方法选择： 采用行格法或镜头法，确定计数行格和镜头内的浮游植物种类和数量。行格法一般每片计数3、5、8行/列中的植物；镜头法必须确定观察镜头（即视野光圈）的直径/面积，通过随机移动镜头，计数所有镜头内的藻类。 使用的工具有： 100μl移液枪（带有0.1毫升刻度的小吸管），容量为0.1毫升的计数框（面积20ⅹ20毫米2）和具有移动台的显微镜。 用前可浸入70%的酒精中，用时取出，用细绢拭净，计数框用前以薄绸布拭净，用毕以水弄湿后轻拭或用水冲净。 取样计数时应注意以下方面： 每瓶标本计数两片取其平均值。同一样品的两片计算结果和平均数之差应不大于其均数的±15％时，其均数视为有效结果，否则还必须测第三片，直至三片平均数与相近两数之差不超过均数的15％为止。 在计数过程中，常碰到某些个体一部分在视野中，另一部分在视野外，这时可规定出在视野上半圈者计数，出现在下半圈者不计数。数量最好用细胞表示，对不宜用细胞数表示的群体或丝状体，应分细胞大小分类计数。 计数时记录保持整洁清晰，便于整理计算。应明确记录采样时间、地点、原水样体积、浓缩体积、计数片数和视野数。 数横条，最少不少于3条具体可自行掌握。 总之不论数视野还是数横条，每片计数到的浮游植物总数应达到200个（低浓度时）-500个（高浓度时）以上。 同一样品的二片计数结果与其均数之差距如果不大于其均数的±15%，这两个相近的值的均数即可视为计数结果。 例：计数第一个片为250个，计数第二片为246个 则两片的均数为（250+246）/2 248 均数与第一片之差：248-250 -2 均数与第二片之差：248-246 2 则：-2/248 -0.0081即 -0.81% 2/248 +0.0081 即 0.81