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四川农业大学历营养博士考题解答
营 养 试 题 解 答
1、测定反刍动物瘤胃降解蛋白的意义和方法?
答:(意义)反刍动物蛋白质质量的评定一直是一个难题,由于瘤胃微生物的作用,使饲料蛋白质通过瘤胃后面目全非,以往用可消化蛋白或酸洗涤不溶氮ADN来衡量其质量的好坏,显然不能反映反刍动物蛋白质消化代谢的实质,而不能准确地指导饲养实践。具体说有以下几点不足:没有反映出日粮CP在瘤胃中的降解和非降解部分;反映不出日粮降解蛋白转化为瘤胃微生物蛋白的效率及合成量;没有反映进入小肠的日粮非降解蛋白和微生物蛋白的量、氨基酸的量及其真消化率。而反刍蛋白新体系则基本上克服了以上弊端。
瘤胃降解蛋白的测定实质是瘤胃蛋白降解率的测定,其方法有:
(1)体内法
①同位素标记结合瘘管技术:饲料中的蛋白质的氮经过同位素标记后,再由真胃或十二指肠处安置的瘘管取出刚离胃的食糜,分析其总非氨氮和微生物氮的含量,计算降解率。体内法忽略了内源氮而低估降解率,测定成本高、费时费力、效率低。
②增量法(回归法):基础日粮(能满足微生物氮需要)+不同水平的待测饲料(保持TDN相当),然后以十二指肠非氨态氮对待测饲料摄入作回归直线,来求降解率。
(2)体外法
①溶解度法:饲料蛋白质在缓冲液或0.15M的NaCI溶液中的溶解度评定;
②瘤胃液孵化法:在模拟瘤胃装置下,对蛋白质在瘤胃液、温度39℃、厌氧条件下共同作用,最后测定蛋白质的降解率;
③酶解法:优点是测定的环境条件容易标准化、稳定性高、实验室之间的可比性好,能大批量在实验室操作,效率高、成本低。但共同弱点是只测定某个时间点的降解、忽略了动态降解。注意PH、孵化时间、温度、酶饱和条件及缓冲液组成。
(3)尼龙袋法
将若干个尼龙袋通过瘤胃瘘管放入瘤胃,在不同时间取出得到饲料蛋白质消失曲线,以不同数学模型计算蛋白质降解率。
尼龙袋法又分为不考虑外排速度和考虑外排速度两种情况。
①不考虑外排速度:
②考虑外排速度:在实际测定中,有一部分蛋白质快速溶解,可不经微生物作用;而非快速溶解部分在微生物作用下,逐步降解。其在瘤胃内不断降解后不断外排,所以外排速度影响降解速度。
随T增加,趋于1;
故有:其中,P:降解率; a:快速降解部分;b:为慢速降解部分;
c:为b的降解速度常数; t:孵化时间;k:外排速度
由于在降解过程中饲料颗粒大小也影响降解速度,所以可进一步考虑大颗粒降解为小颗粒的速度(k2),小颗粒排除瘤胃的速度为k1,则有:,所以,在用尼龙袋法测定饲料降解率要考虑以下因素:①袋子孔径;②饲料颗粒大小;③样品量与袋子容积;④微生物污染校正;⑤日粮配制;⑥孵前浸泡和孵化时间;⑦冲洗液温度、PH、冲洗次数。
2、Weeder与Van Soest的纤维分析方法的差异,此分析方法在动物营养研究中有何意义?纤维成分在动物营养和饲料营养价值评定中有何作用?
答:Van Soest1976年提出了中性洗涤纤维(NDF)、酸性洗涤纤维(ADF)、酸性洗涤木质素(ADL)作为测定饲料中纤维性物质的指标,其测定方案如下图所示:
半纤维素 NDF-ADF 纤维素 ADF-(木质素+灰分) 木质素 ADF-纤维素-灰分
由于传统粗纤维的测定方法(Weeder法)是将饲料样品经1.25%稀酸、稀碱各煮30min后所剩余的不溶解碳水化合物。该分析方法与Van Soest相比有如下缺点:①细胞壁中有一部分物质(部分半纤维素、纤维素、木质素)溶解在稀酸或稀碱中,无形中低估了粗纤维的有害作用,高估了其营养价值,同时又增加了无氮浸出物的计算误差,给生产带来误导;②评定方法笼统,粗纤维中半纤维素、纤维素、木质素比例千差万别,所以用粗纤维的方法无法精确估计营养物质的可利用性。而Van Soest的纤维分析方法在基本上克服以上缺点,因此在营养学上,可以进一步精确估计饲料的营养价值。
意义:
用Van Soest方法可将饲料中的纤维素、半纤维素、木质素和矿物质(SiO2)分别测出,比weende法单纯测定粗纤维既具有实用价值,又节省时间;
清楚表明了植物性饲料的组成部分及动物对其利用程度。植物性饲料的细胞内容物大部分可以被动物利用,NDF和ADF中的半纤维素、纤维素的利用程度则取决于植物细胞的木质化程度;而木质素则不能被动物利用;
评定饲草和多纤维饲料时,一旦测出了一种饲料的NDS、NDF、ADF、ADL,就可以单独或配合使用测定值来评定饲料的营养价值;
Van Soest法尤其有益于高产奶牛饲料的评定。高产奶牛为了保证奶的质与量,饲料中必须有一定量的多纤维饲料。另外,用NDF评定粗饲料比ADF和粗纤维指标评定更适用。用来预测饲草的能量营养价值误差较小。
纤维成分在动物营养和饲料营养价值评定中有何作用:
反刍动物 ①维持瘤胃的正常功能和动物的健康。淀粉和中性洗涤纤维(NDF)是
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