61血培养标本检测精读.doc

血培养检验的操作规程 目录 1 目的 4 2 标本类型 5 3 标本的采集与运送 5 3.1 采集时间： 5 3.2 采集部位和采样次数： 5 3.3 采集量： 5 3.4 采集时的皮肤消毒： 5 3.5 标本运送： 6 4 血液、脑脊液、骨髓标本的操作 6 4.1 培养瓶的拒收标准 6 4.2 血培养瓶的处理 6 4.3 阳性培养瓶的操作 6 4.4 阴性培养瓶的操作 7 4.5 血培养阳性结果污染菌统计分析 7 4.6 影响因素 8 4.7 怀疑高传染性细菌感染 8 5 导管、导管头等标本的操作 8 5.1 标本采集 8 5.2 标本的接种 9 5.3 培养阳性 9 5.4 培养阴性 9 6 结果报告 9 6.1 危急值报告 9 6.2 初步报告 9 6.3 最终报告 9 6.4 结果解释 9 7 血培养常见病原菌 9 8 流程图 10 9 生物安全 10 10 参考文献 10 11 相关文件及表格 11 目的 正常人的循环系统、骨髓是无菌的，当人体局部感染向全身播散和出现全身感染时，血液等体液中可出现细菌，依程度不同称为菌血症或败血症。血培养是有效的细菌学检验方法，检测血培养标本中的病原菌，目前主要是培养需氧菌，需要时，要求能检出厌氧菌。为临床提供病原菌的抗菌药物敏感性等信息。 标本类型 血液、脑脊液、骨髓、导管头等无菌体液标本。 标本的采集与运送 采集时间： 当怀疑血流感染或脓毒血症时，应做常规血培养。血液标本的采集一般应于病人发热初期或发热后采集。应尽量选择在抗菌药物应用之前，对已用药物的患者，因病情不允许停药，应在下一次用药前采集。实际情况需要时，血培养应在短时间内立刻进行采集。间隔性抽血仅用于持续性菌血症的患者，如心内膜炎或其他血管内（如导管相关性）感染时。 采集部位和采样次数： 培养的阳性率与采样的频率和部位有一定的相关性，增加采样的次数和选择多部位连续采样，将会提高血液培养的阳性率，建议对血流感染可疑患者进行2-3次血培养，对成年患者不要只进行一次单一的血培养，血培养后2-5天不必重复进行。提倡双侧采血（同时采集左侧及右侧）,双侧各采集一套。 采集量： 血液中细菌和真菌的检出率依赖于足够的血量,但用血量过多会引起假阳性。血液样本量与培养基量推荐比例为1：4-1:8，但血量增加时阳性率增加，最多每瓶增加到10ml。 合格血量为：成人每瓶6～10ml,婴幼儿1～4ml。 采集时的皮肤消毒： 培养瓶消毒程序：在静脉穿刺部位固定后，用70%酒精消毒血培养瓶上的橡胶塞，作用60s，用无菌纱布或无菌棉签清除橡胶塞表面残余酒精使其干燥。 检查瓶有无污染、破损,如果是，切勿使用。 皮肤消毒程序： 为了减少皮肤定植菌的污染，静脉穿刺部位必须消毒。可以使用70%酒精或1%-2%碘酊。70%酒精消毒静脉穿刺部位待30s以上，从穿刺点向外画圈消毒，至消毒区域直径达3cm以上， 然后用1%-2%碘酊作用30s，再用70%酒精脱碘。碘过敏患者，用70%酒精消毒60s，待酒精挥发干燥后采血。采血人员不得在皮肤消毒之后接触静脉，除非戴有消毒手套。 推荐使用无菌注射器抽血，抽血后将血液转移到血培养瓶中，轻柔地倒置数次以防凝固。不可以将血液注入含有抗凝素的其他容器中，不可以使用连接采血管的持针器直接将血液抽入血培养瓶内。 标本运送： 采血后应立即送检，如不能立即送检，需置室温保存，12小时内送检，切勿冷藏或置于温箱。 血液、脑脊液、骨髓标本的操作 培养瓶的拒收标准 未正确标记的培养瓶及无标签无条形码的培养瓶。 破损、损坏及泄漏的培养瓶。 有凝块的培养瓶。 含有SPS以外的其他抗凝剂的培养瓶。 血培养瓶的处理 将血培养标本放入培养箱进行培养，培养时间为5d，期间每天观察培养瓶生长曲线变化。 血培养瓶接种后，应每天观察并记录两次生长情况，一旦发现阳性生长迹象，应立即做处理。 对待可疑阳性标本，应尽量在确认结果后60min内完成阳性结果确认及发出危急值报告。 阳性培养瓶的操作 若培养瓶显示有微生物生长，则用一次性无菌注射器抽取培养液至血平板、巧克力平板并涂片两张进行革兰染色。 抽取培养液的操作步骤： 75%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s，将瓶口过火三次，使瓶口干燥。 用一次性注射器抽取适量培养液，不拨针头，直接滴加在血、巧平板及涂于玻片上。 注射器使用后不得再重复使用，不能将针头从注射器上取下、截断针头，回套针帽等，应将其完整地置于一次性锐器盒中。 将两块涂片进行革兰染色，置于油镜下镜检，观察有无细菌。如果涂片阳性，根据染色反应及细菌形态特征，将染色结果即刻通知临床值班医生，并在《危急值报告记录表》上登记。 如临床医生有需要立即做药敏实验，可从阳性培养瓶中取出一些培养液直接做药敏实验，在报告单上注明仅作为初步报告供临床医生