蟾蜍腓肠肌标本制作.docVIP

实验材料与方法 2.1 实验材料 2.1.1实验动物： 蟾蜍，由医大二院实验动物中心提供，雌雄不限，体重40±5g，实验前于实验室饲养，室温20±2.0℃。 2.1.2实验药品： 0.0825mg/ml的三唑磷溶液，0.165mg/ml的三唑磷溶液，0.33mg/ml的三唑磷溶液，实验前由广谱用三唑磷杀虫剂配置。任氏液，实验前配置好。 2.1.3实验器材： ⑴SMUPP-E型生物信号处理系统 Model SMUP-E.Bio-electric Signals Processing System 复旦大学上海医学院生理与病理生理学研制 。 ⑵ 张力换能器 ⑶hp caserjet 1000型打印机 ⑷常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针和玻璃针）。 ⑸其他：肌动器 2.2.2实验过程 ⑴破坏蟾蜍脑脊髓 取蟾蜍一只用自来水冲洗干净,左手握蟾蜍,小指和无名指夹住后肢,拇指按压背部,中指放在胸腹部,用食指下压头部前端使头前俯,右手持金属探针由枕骨沿正中线向脊柱端触划,当触到凹陷处即枕骨大孔处,可将探针由此垂直刺入皮肤,入枕骨大孔后将针折向前方插入颅腔并左右搅动捣毁脑组织,而后退针至刺入点皮下,针尖向后刺入脊椎管捣毁脊髓,当四肢松软,呼吸消失则表示脑脊髓完全毁坏,否则应按上法重复操作剪除躯干上部及内脏 在骶髂关节水平以上1cm处用粗剪刀剪断脊柱,左手执镊子夹紧脊柱断端 骶骨端 并稍向上提起,使蟾蜍的头与内脏自然下垂,右手持大剪刀,沿两侧将蟾蜍的头,前肢和内脏全部剪除并弃置污物桶内,仅保留后肢,腰背部脊柱及由它发出的坐骨神经丛 呈灰白色 .剥皮 左手持大镊子夹住脊柱断端,不要夹住或触及神经,右手捏住其上的皮肤边缘,向下剥掉全部后肢的皮肤,将标本放在盛有任氏液的培养皿中.将手及用过的剪子,镊子,蛙板等全部手术器械用自来水洗净,再进行以下操作.分离两腿 用镊子从背位夹住脊柱将标本提起,用大剪刀剪去向上突出的骶骨 勿损伤坐骨神经 ,然后沿正中线将脊柱分为两半并从耻骨联合中央剪开两侧大腿,使两腿完全分离,将两腿浸于盛有任氏液的烧杯中.游离坐骨神经 取一后肢,腹面向上,在脚趾部位用大头针或蛙钉将标本固定在蛙板上,沿脊柱侧用玻璃针分离坐骨神经,然后用玻璃针轻轻勾起坐骨神经,逐一剪断其神经分支,用粗剪刀剪断脊柱,保留一块与坐骨神经相连的脊椎骨.再将标本背侧向上固定于蛙板上,用镊子提起梨状肌并剪断,再沿坐骨神经沟 股二头肌与半膜肌之间的裂隙处 分离出大腿部的坐骨神经并用玻璃针轻轻勾起坐骨神经干,剪断所有分支一直游离至腘窝部为止 ⑥用镊子夹住脊椎骨,将神经搭在腓肠肌上,用剪刀将膝关节周围的大腿肌肉剪除,将膝关节上方的股骨刮于净,暴露股骨并在距膝关节上1cm处剪断.保留部分即是坐骨神经-腓肠肌标本 ⑦在跟腱处穿线结扎,剪断结扎线以下靠近脚趾端的跟腱.左手提起结扎线,右手用玻璃分针分离腓肠肌至膝关节处再在膝关节处将小腿其余部分全部剪掉,即制备出一个具有附着在股骨上的腓肠肌和带有支配腓肠肌的坐骨神经标本.将浸有任氏液的锌铜弓短暂接触坐骨神经,若腓肠肌发生明显收缩,则表示标本的兴奋性良好,可放入有任氏液的烧杯中备用坐骨神经-腓肠肌标本将标本的股骨头固定在肌槽的骨头固定孔内，神经搭在肌槽电极上，腓肠肌肌腱上的扎线与张力换能器接头相连，换能器输出端与计算机1通道，刺激电极与坐骨神经相连，电极接头与计算机程控刺激器输出端相连。调节好扎线的张力，不可过松或过紧，以使肌肉自然拉平为宜（保证肌肉一旦收缩，即可牵动张力传感器的应变梁）。