《化妆品中17种着色剂的测定.docVIP

附件4 化妆品中7种发用品着色剂的检测方法 1 适用范围 本方法规定了化妆品中酸性紫43（CI 60730）、碱性紫14（CI 42510）、酸性橙3（CI 10385）、碱性黄87、碱性蓝26（CI 44045）、碱性红51、碱性橙31等7种染发剂含量的高效液相色谱测定方法。 本方法适用于染发类和烫发类化妆品中酸性紫43（CI 60730）、碱性紫14（CI 42510）、酸性橙3（CI 10385）、碱性黄87、碱性蓝26（CI 44045）、碱性红51、碱性橙31等7种染发剂含量的测定。 2 方法提要 试样经甲醇超声提取后，过0.45 μm滤膜，采用高效液相色谱系统分离，二极管阵列检测器进行检测，外标法定量。本方法的检出限、定量限和取样品5.0 g时检出浓度、定量浓度见表1。 表1 各种发用品着色剂的检出限和检出浓度 中文名称 CAS号 检出限 （μg） 定量限 （μg） 检出浓度 （μg/g） 定量浓度 （μg/g） 酸性紫43（CI 60730） 4430-18-6 3.0 10.0 0.6 2.0 碱性紫14（CI 42510） 632-99-5 0.3 1.0 0.06 0.2 酸性橙3（CI 10385） 6373-74-6 6.0 17.5 1.2 3.5 碱性黄87 116844-55-4 15.0 50.0 3.0 10 碱性蓝26（CI 44045） 2580-56-5 3.0 10.0 0.6 2.0 碱性红51 12270-25-6 0.3 1.0 0.06 0.2 碱性橙31 97404-02-9 6.0 17.5 1.2 3.5 3 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为色谱纯，水为一级水。 3.1 甲醇。 3.2 四氢呋喃。 3.3 乙酸铵：分析纯。 3.4 乙酸铵溶液（0.02 mol/L）：称取1.54 g乙酸铵（3.3），加水至1000 mL，溶解，经0.45 μm滤膜过滤。 3.5 发用品着色剂：酸性紫43（CI 60730）、碱性紫14（CI 42510）、酸性橙3（CI 10385）、碱性黄87、碱性蓝26（CI 44045）、碱性红51、碱性橙31；纯度均≥90%。 3.6发用品着色剂混合标准储备液（1.0 mg/mL）：分别称取7种发用品着色剂标准物质（3.5）0.1 g（精确至0.1 mg）于100 mL容量瓶中，甲醇（3.1）稀释定容。溶液应于4℃储存，有效期为二个月。 3.7发用品着色剂混合标准系列溶液：分别移取一定量的2种发用品着色剂（酸性紫、碱性紫14）标准储备液（3.6），用甲醇配制成浓度为5.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0 μg/mL的标准系列溶液；分别移取一定量的5种发用品着色剂（酸性橙3、碱性黄87、碱性蓝26、碱性红51、碱性橙31）标准储备液（3.6），用甲醇配制成浓度为1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 μg/mL的标准系列溶液。溶液应于4℃储存，有效期为二个月。 4 仪器与设备 4.1 高效液相色谱仪：配二极管阵列检测器。 4.2 分析天平：感量分别为0.1 mg和1.0 mg。 4.3 超声波清洗器。 4.4 涡旋混匀器。 4.5 有机微孔滤膜：0.45 μm。 5 分析步骤 5.1 样品预处理 准确称取试样5.0 g（精确至1 mg）于25 mL比色管中，加入1.0 mL四氢呋喃（3.2），再加入20 mL甲醇（3.1），涡旋振荡2min，在超声提取30min后，放置至室温，用甲醇（3.1）定容，摇匀，过0.45 μm滤膜，待测。 5.2 色谱参考条件 色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱，250 mm×4.6 mm（内径），5 μm；或相当者流动相：A相（甲醇）+B相（0.02 mol/L乙酸铵（pH 4.0）），梯度洗脱程序见表2流速：1.0 mL/min柱温：30℃进样量：10 μL检测器：二极管阵列检测器检测波长：碱性蓝26为616 nm；碱性红51、碱性紫14、酸性紫43为520 nm；碱性橙31、碱性黄87、酸性橙3为480 nm。表2 梯度洗脱程序 时间，min 流动相A（%） 流动相B（%） 0 5 95 10 30 70 25 80 20 35 80 20 35.1 5 95 41 5 95 5.3 测定 本方法采用外标校准曲线法定量测定。以系列标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，作标准曲线线性回归方程，以试样的峰面积与标准曲线比较定量。 6 计算 试样中发用品着色剂含量（μg/g），按式（1）计算： ……………………. …………… 1 式中：w—试样中发用品着色剂的含量，μg/g； C—试样溶液中发用品着色剂的含量，μg/mL； V—提取溶液体积，mL； m—样品