多巴胺及血清动素对淡水长臂大虾卵黄生成作用影响之研究.doc

多巴胺及血清動素對淡水長臂大蝦卵黃生成作用影響之研究:離體試驗 effect of dopamine and 5-hydroxytryptamine on the vitellogenesis of freshwater giant prawn, Macrobrachium rosenbergii in vitro 研究生:吳嘉哲 Chia-Che Wu 指導教授:郭欽明 Ching-Ming Kuo 鄭文騰 Win-ton Cheng [摘要] 甲殼類動物的生殖主要受到神經激素所影響，分別由眼柄中的X-器官竇腺複合體 X-organ sinus gland complex 合成釋放的卵黃生成抑制激素 VIH 以及腦或胸神經節 Thoracic ganglia 所釋放的卵黃生成促進激素 VSH ，在激素相互影響下，達到對生殖的調控。 多巴胺 DA 與血清動素 5-HT 屬於生物胺，在甲殼類生理調節上參與多種激素合成與釋放，本研究以淡水長臂大蝦 Macrobrachium rosenbergii 作為材料，利用離體試驗方式 In vitro 探討多巴胺與血清動素在神經節組織共同培養對於卵黃生成作用之影響及其調節途徑。肝胰臟與卵巢組織經由多巴胺及血清動素刺激，在腦、胸神經節或腹神經節共同培養10小時，以酵素連結免疫分析法 ELISA 檢測培養液中卵黃前質含量變化。經由10-6、10-7、10-8 M不同劑量多巴胺或血清動素刺激肝胰臟與卵巢組織，多巴胺有抑制肝胰臟合成卵黃前質之作用以10-6 M抑制效果較為明顯，至於血清動素確有促進之作用，以10-6~10-7 M 5-HT/prawn下促進效果最為明顯。卵巢組織中在不同劑量多巴胺或血清動素與不同神經節組織共同培養下，卵巢組織中卵黃生成作用不受影響。肝胰臟組織在添加10倍D1型受器拮抗劑 SCH23390 及 10倍D2型受器拮抗劑 Domperidone 刺激下，肝胰臟組織在添加10-6 M D1型受器拮抗劑 SCH23390 及DA 後具有促進卵黃前質生成量的增加，與胸神經節共同培養下之促進效果更為明顯，至於使用106 M D2型受器拮抗劑 Domperidone 及DA，並與神經節組織共同培養下，肝胰臟組織卵黃生成量仍受到抑制，顯示多巴胺D1型受器拮抗劑 SCH23390 具有抗衡多巴胺抑制作用，多巴胺的抑制作用是經由多巴胺D1型受器途徑。卵巢組織添加10倍D1型受器拮抗劑 SCH23390 及D2型受器拮抗劑 Domperidone 刺激並與神經節組織共同培養下，並無抗衡多巴胺抑制作用之現象。在血清動素調控之實驗中得知，發現添加5-HT及10-6M的5-HT1型受器拮抗劑 DL-Propranolol 對肝胰臟有促進卵黃生成作用之效果，與胸神經節共同培養下卵黃生成之促進效果明顯增強。至於添加5-HT2型受器拮抗劑 Cinanserin 對卵黃生成作用仍呈現抑制之效果，顯示血清動素的調控途徑可能經由5-HT2型受器。卵巢組織添加10倍5-HT1型受器拮抗劑 DL-Propranolol 及5-HT2型受器拮抗劑 Cinanserin 刺激並與神經節組織共同培養下，亦無抗衡血清動素促進作用之現象，卵黃生成並無明顯差異。DA及5-HT對肝胰臟或卵巢組織離體試驗中對卵黃生成作用影響之研究結果，與體內試驗 In vivo 之結果一致 范 2001 。在淡水長臂大蝦肝胰臟是卵黃前質主要之合成部位，DA具有抑制作用，主要是經由D1-dopaminergic receptor 作用於胸神經節影響VSH之分泌釋放至於血清動素之促進作用，主要經由5-HT2 serotnergic receptor之調控途徑。 關鍵字: 淡水長臂大蝦、多巴胺、血清動素、卵黃前質、調控途徑 【Abstract】 The reproductive process of crustaceans is regulated primarily by vitellogenesis inhibiting hormone VIH and vitellogenesis stimulating hormone VSH , respectively synthesized and released from x-organ sinus gland complex in eyestalks ,and brain or thoracic ganglia.The biogenic amines, dopamine DA and serotonin 5-hydroxytryptamine, 5-HT are known to be involved in