实验二果蝇唾液腺染色体的制备和观察doc .doc

CHANGSHA MEDICAL UNIVERSITY 教 案 2013～2014学年第 一 学期 课 程 名 称 普通遗传学 开 课 系 部 基础医学系 开 课 教 研 室 生物技术教研室 授 课 教 师 龚琳 职 称 助 教 授 课 班 级 2012级生物技术 学 生 人 数 28 长 沙 医 学 院 教 务 处 制 长 沙 医 学 院 教 案 课程名称 普通遗传学 授课题目（章节或主题） 实验二 果蝇唾液腺染色体的制备和观察 授课教师 龚琳 所属系（部） 基础医学系 所属教研室 生物技术教研室 职称 助教 授课时间 年 月 日第 周星期 第 节第 次课 授课时数 4学时 授课班级 生物技术 专业（本科√ 专科□） 2012级 级 1 班 教学课型 理论课□ 实验课√ 见习课□ 习题课□ 讨论课□ 其它□ 教材名称、作者、出版社及出版时间 《遗传学实验(第2版)》 杨大翔 科学出版社; 2010 教学目的要求： 1．掌握取出果蝇幼虫唾液腺的技术和制作唾液腺染色体标本的方法。 2．熟悉果蝇唾液腺染色体的形态特征。 3．了解果蝇唾液腺染色体在遗传学研究中的意义。 重点与难点： 重点：观察果蝇唾腺染色体的形态特征 难点：制作唾腺染色体标本 教学方法（请打√选择）： 讲授法 √ 讨论法 □ 启发式 □ 自学辅导法 □ 练习法(习题或操作)□ 读书指导法 □ ＰＢＬ教学法 □ C B L教学法 □ 其他 □ 教学手段（请打√选择）： 板书 □ 实物 √ 标本 √ 挂图 □ 模型 □ 投影 √ 幻灯 □ 录像□ CAI（计算机辅助教学）□ 教学过程设计和教学内容： 实验二 果蝇唾液腺染色体的制备和观察 一、实验原理 本世纪初，D.Kostoff用压片法首先在果蝇（Drosophila melanogaster）幼虫的唾液腺细胞核中发现了特别巨大的染色体——唾液腺染色体（salivary gland chromosomes）。由于它具有许多重要特点而成为细胞遗传学、发生遗传学、进化遗传学和分子遗传学研究中不可多得的好材料。 1.1果蝇唾腺染色体的特点： 巨大染色体：这种染色体比普通染色体大得多，宽约5um，长约400um，相当于普通染色体的100—150倍，因而又称为巨大染色体。 2. 多线染色体：果蝇的唾腺细胞停止在分裂间期（永久间期 ），染色体核蛋白纤维不断复制，平行排列形成巨大而伸展的多线染色体唾腺染色体经过多次复制而并不分开，每条染色体大约有1000—4000根染色体丝的拷贝，所以又称多线染色体(polytene chromosome)。 3. 体联会：类似有丝分裂中的同源染色体联会。由于同源染色体紧密配对几乎相互融合，使果蝇的唾腺染色体只有二倍体染色体数目的单元数。 4.横纹结构：染色体上有横纹结构，这些横纹的数目和位置往往是恒定的，代表着果蝇等昆虫的种的特征；可用于基因定位； 5. Puff结构：幼虫的不同发育期，浓缩的染色质纤维会成群解旋、松开，形成泡状松散结构，使相应的基因得以表达，这种泡状结构称Puff结构，亦称染色体的疏松。 1.2 普通果蝇（2n=8）唾腺染色体的特点表现在： 1.各染色体着丝点附近异染色质区相互结合形成染色很深的染色中心。 第Ⅱ、Ⅲ对染色体呈Ｖ形（中着丝粒），各有两臂。 Ｘ染色体呈棒状，第Ⅳ对染色体呈粒状，观察时可见五条臂由染色中心向外蜿蜒伸展。 二、实验材料 1. 仪器　光学显微镜、眼科镊、解剖针两根、载玻片、盖玻片、滤纸片、酒精灯、镜头纸。 2. 试剂　改良卡宝品红、1mol/L HCl 、生理盐水（0.7%　NaCl）、香柏油。 3. 标本　果蝇三龄幼虫。 三、实验步骤 1．培养果蝇三龄幼虫 将果蝇放在营养丰富的培养基中，15℃～18℃下饲养，当幼虫爬上瓶壁准备化蛹前，即为三龄幼虫，此时虫体肥大，便于解剖，是制备唾腺染色体