文旦白柚溃疡病之病原特性及果实流胶之部分理化与抑菌性质.doc

文旦、白柚潰瘍病之病原特性及果實流膠之部分理化與抑菌性 研究生：賴映糸 Lai, Ying-Mi 指導教授：陳滄海 Chen, Tsang-Hai 【摘要】 柑桔潰瘍病是由Xanthomonas axonopodis pv. citri所引起，是目前柑桔產業最重要且最具有破壞性之細菌性病害。柑桔為台灣最大宗經濟果樹，栽培面積及產量為台灣經濟果樹之首，其中文旦、白柚截至95年總交易量為7415.8及691.2公噸。台灣文旦及白柚品質佳、且耐儲運，為外銷柑橘類水果之ㄧ。田間調查之結果顯示於94年麻豆地區因颱風侵襲，造成文旦及白柚葉片受傷，同年9月調查即發現該地區文旦、白柚葉片嚴重發生潰瘍病害。95年台東池上及東河地區，同年7月調查亦發現該地區文旦及白柚葉片也有零星災情傳出。文旦及白柚採集田間文旦、白柚及其他不同品種柑桔類之罹病葉進行分離，並經生理生化反應及PCR鑑定，證明田間文旦、白柚及其他柑桔類之葉片潰瘍病均為。潰瘍病菌侵入途徑為氣孔及傷口，調查柑桔類葉片氣孔數目及結構中發現新葉及老葉分別以抗病品種白柚葉片及感病品種葡萄柚葉片最多。將文旦、白柚及葡萄柚潰瘍病菌稀釋為不同濃度分別穿刺接種於文旦、白柚及茂谷柑之葉片，結果以文旦潰瘍病菌之致病濃度104 cfu/ml最低。另將文旦、白柚、茂谷柑及墨西哥萊姆葉片研磨之汁液進行對不同寄主來源潰瘍病菌抑菌測試，結果顯示，均無抑菌效果；進一步利用轉殖綠色螢光蛋白之潰瘍病菌觀察，於文旦、白柚及茂谷柑葉片中潰瘍病菌均有擴散之情形，表示文旦及白柚葉片葉片內無抑菌物質潰瘍病菌。將文旦、白柚及葡萄柚潰瘍病菌稀釋為不同濃度分別穿刺接種於文旦、白柚及柳丁未成熟之果實上，接種後置於32恆溫箱相對濕度維持在91 %以上，柳丁果實接種濃度於107 cfu/ml即開始有病徵產生；文旦及白柚果實均無病徵產生，但在傷口處有流膠現象產生。利用轉殖綠色螢光蛋白之潰瘍病菌觀察，於柳丁果實中潰瘍病菌均有擴散之情形，但在接種後第五天具有綠色螢光蛋白標識之潰瘍病菌，在文旦及白柚果實上拓殖範圍，較柳丁果實上小，有侷限之現象，無法從接種部位向外蔓延及增殖。進一步測試，發現文旦及白柚果實流膠對不同寄主來源之潰瘍病菌均有抑制效果，其抑制圈平均為7.01±1.44及6.53±1.75 mm；但對其他植物病原細菌及拮抗菌無抑制，即文旦及白柚果實流膠之抑菌效果具有專一性。文旦及白柚果實流膠之抑菌機制為殺菌作用。測試不同溫度及pH值對文旦及白柚果實流膠抑菌成份活性之影響，結果顯示果實流膠有效抑菌成份之不活化溫度為80 ；果實流膠在檢測的酸鹼值pH 3至10的範圍內，抑菌作用不影響。另外以260及280吸光值曲線分析結果得知，文旦及白柚果實流膠於280吸光值處有一高峰、260處有一低峰，故可推測文旦及白柚果實流膠之有效抑菌成份可能為一蛋白質。分析文旦及白柚果實流膠有效抑菌成份之分子量大小，抑菌成份分子量大小可能為14,000 MW以上的大分子物質。測試潰瘍病菌對九種市售藥劑之感受性，結果田間之潰瘍病菌對植保手冊推薦藥劑83.1 %嘉賜銅可濕性粉劑800 X不具感受性。測試藥劑中以多保鏈黴素1000 X、鏈四環黴素1000 X、硫酸鏈黴素1000 X潰瘍病菌佳抑制效果。 柑桔潰瘍病、Xanthomonas axonopodis pv. citri、果實流膠、偵測鑑定commercial fruit trees in Taiwan; it has not only the most of output, but the growing area as well. The trade amount of Wentan-pomelo and Pai-pomelo by 2006 respectively is 7,415.8 tons and 691.2 tons. Wentan-pomelo and Pai-pomelo which both posses fine quality and are able to endure the storage and transportation are also one of the export citrus fruits. In 2005, Matou area was successively attacked by 612 flood in June, Typhoon Haitang in July and Typhoon Talim in August which caused great damage to the leaves of Wentan-pomelo and Pai-pomelo. The field investigation done in September in Mat