生化重点_问题答案.doc

从分子组成特点、基本组成单位、一级结构的概念、化学键、二级结构的形式、化学键、末端比较蛋白质与核酸。 蛋白质：各蛋白质含氮量接近16%；基本组成单位为L-α-氨基酸；一级结构是指氨基酸序列，连接键是肽键；二级结构是指蛋白质主链局部的空间结构，主要为α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规卷曲，化学键为氢键； 核酸：分子组成为碱基、戊糖、磷酸；基本组成单位为核苷酸；DNA的一级结构是核酸中核苷酸的排列顺序，骨架为磷酸戊糖；二级结构是双螺旋结构，疏水作用力和氢键共同维系着；mRNA在真核细胞中起始为5’-末端帽结构（m7GpppNm），3’-末端的多聚A尾结构；tRNA的二级结构为三叶草形。 利用了蛋白质带电性质、大分子性质分离纯化蛋白质的方法各有哪些？分别列举两种可对蛋白质进行定量测定和分子量测定的方法。 利用了蛋白质带电性质：电泳、离子交换层析；利用大分子性质：透析、超滤、凝胶过滤。定量测定：测定蛋白质溶液的A280、定氮法；分子量测定：SDS、超速离心法。 影响酶活性的因素有哪些？从结构、与酶结合部位、对Km、Vmax影响比较竞争性抑制，非竞争性抑制，反竞争性抑制。 影响因素：酶浓度、底物浓度、pH、T、抑制剂、激活剂； 结构 与酶结合部位 Km Vmax 竞争性抑制 与酶底物结构相似 酶的活性中心 增大 不变 非竞争性抑制 酶-底物-抑制剂复合物 酶活性中心外的必需基团 不变 增大 反竞争性抑制 酶-底物-抑制剂复合物 酶和底物形成的中间产物 降低 降低 酶的必需基团、活性中心、最适pH、最适温度、变构酶、共价修饰、抑制剂、同工酶、酶原、酶原激活的概念。 酶的必需基团：酶蛋白氨基酸残基的侧链中与酶活性密切相关的化学基团。 活性中心：必需基团在空间上彼此靠近，组成具有特定空间结构的区域，能与底物特异结合转化为产物，这一区域称为酶的活性中心。 最适pH：在某一pH时，酶、底物、辅酶的解离状态最适合相互结合及催化反应，反应速率最大。 最适温度：酶促反应速度最快时的环境温度。 变构酶：某些小分子物质与酶活性中心外的变构部位或调节亚基结合，使酶构象改变，从而活性改变，这种调节方式称为变构调节，受调节的酶称为变构酶，由多亚基组成。 共价修饰：酶蛋白肽链上一些基团可与某种化学基团发生可逆共价结合，从而改变酶的活性。 抑制剂：使酶催化活性下降甚至丧失活性，但并不使酶蛋白变性的物质。 同工酶（Isoenzyme）：是指催化相同的化学反应，但酶蛋白的分子结构、理化性质乃至免疫学性质不同的一组酶。它存在于同一种属或同一个体的不同组织或同一细胞的不同亚细胞结构中，使不同的组织、器官和不同的亚细胞结构具有不同的代谢特征。 酶原：有些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体，称为酶原。 酶原激活：在一定条件下转变成为有活性的酶的过程，实际上是酶活性中心形成和暴露。 要代谢途径有哪些？每一途径的关键酶及所催化的反应？每一途径的生理意义是什么？如何调节？ 1）糖酵解：G+ATP 已糖激酶 G-6-P+ADP F-6-P+ATP 6-磷酸果糖激酶-1 F-1,6-2P+ADP PEP+ADP 丙酮酸激酶 丙酮酸+ATP 生理意义：（1）迅速提供能量，当机体缺氧或剧烈运动肌肉局部血流不足时，主要供能。 （2）是神经、白细胞、骨髓等组织获能的必要途径，即使在有氧情况下也进行强烈的酵解而获能。 （3）成熟红细胞无线粒体，仅靠无氧酵解供能。 2）有氧氧化：包括糖酵解途径、丙酮酸氧化脱羧、三羧酸循环及氧化磷酸化。 丙酮酸氧化脱羧：丙酮酸+NAD+HSCoA 丙酮酸脱氢酶复合体 CO2+NADH+H+乙酰CoA 三羧酸循环：草酰乙酸+乙酰CoA 柠檬酸合酶 柠檬酸+CoA 异柠檬酸+NAD α-酮戊二酸脱氢酶复合体 α-酮戊二酸 α-酮戊二酸 异柠檬酸脱氢酶 琥珀酸酰A 生理意义：是机体获能的主要方式。 三羧酸循环的生理意义：TCA是三大营养素的最终代谢通路；是糖、脂肪、氨基酸代谢联系的枢纽；为其他物质合成提供小分子前提物质，为氧化磷酸化提供还原当量。 3）磷酸戊糖途径：G-6-P 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶 磷酸戊糖 生理意义：提供5-磷酸核糖作为体内合成各种核苷酸及核酸的原料，提供细胞代谢所需的NADPH。 4）糖原合成：当机体需要葡萄糖时，糖原迅速被动用以供急需。 调节： 代谢途径 变构酶 变构激活剂 变构抑制剂 糖酵解 已糖激酶 AMP.ADP.FDP.Pi G-6-P 6-磷酸果糖激酶-1 FDP 柠檬酸 丙酮酸激酶 ATP.乙酰CoA 三羧酸循环 柠檬酸合酶 AMP