血常规全自动分仪COULTER LH750(仪器sop编写附件).doc

仪器原理、性能、方法原理 1.1 白细胞计数原理 1.1.1 电阻抗法：血细胞是一种不良导体，将血标本稀释、溶血后制成白细胞悬液，在负压的作用下，悬液流经一个带有微孔的恒压电路时，每个细胞会产生一个电阻脉冲信号，这些信号经过微机的放大、甄别、整形等处理，最后计算出单位体积内的白细胞数。 1.1.2 光学法：血标本在稀释液和溶血剂的作用下制成一定浓度的白细胞悬液，根据流体力学的鞘流技术原理，使得白细胞一一流经仪器检测器，每个细胞在通过检测器时都会受到一束固定波长的激光照射，微机根据光的折射、反射、前向角等信号识别和计数细胞。 1.2 白细胞分类原理 1.2.1 体积、电导、光散射法：血标本在特殊的稀释液和溶血剂作用下红细胞被破坏，但白细胞形态和结构仍保持自然状态。当白细胞在鞘流的引导下流经检测器时，会同时受到V、C、S 3种技术的检测。V是利用电阻抗法测定细胞体积；C是利用高频电磁波，根据各种细胞核浆的电导性不同测量细胞内部结构、核浆比例；S是利用光散射原理测量细胞内颗粒的大小、密度等结构特性。计算机根据这3种技术得到的资料综合分析，将中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞一一分开，以白细胞分类散点图显示这些细胞，并提示异常淋巴细胞、幼稚细胞、有核红细胞、抗溶血红细胞等信息。 .2.2 电阻抗与射频技术分类法：通过4个不同的检测系统完成白细胞的分类：嗜酸性细胞、嗜碱性细胞利用其特有的抗酸和抗碱能力，在各自特殊试剂的作用后，进入独立通道直接计数；在直流电和交流电的同时作用下，仪器根据细胞大小以及细胞内部的核结构、核浆比例、胞浆颗粒等信息区分中性、淋巴、单核细胞；幼稚细胞由于其膜上脂质成份比成熟细胞少，在硫化氨基酸的保护下具有一定的抗溶血能力，在独立的通道内直接计数。.3 红细胞检测原理 1.3.1 红细胞计数（RBC）、平均红细胞体积（MCV）、血细胞比容（HCT）、红细胞分布宽度（RDW）一般采用电阻抗法。原理同白细胞计数。 .3.2 血红蛋白浓度（HGB）测定：采用溶血比色法。血标本在溶血素的作用下，红细胞破坏，溶血素与血红蛋白结合成稳定的氰化血红蛋白（或HGB-季胺盐衍生物）。在特定波长（通常为530550nm）下比色，吸光度的变化与液体中血红蛋白含量成正比，HGB的含量。.3 红细胞平均血红蛋白含量（MCH）、红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）是根据RBC、HCT、HGB计算而得。.4 血小板检测原理 1.4.1 电阻抗法：血小板测定与红细胞计数原理一致，仪器将直径2～30fl的颗粒统计为血小板，大于36fl 1.4.2 光学法：根据同质性球体光散射的Mie理论，当球形化的血小板单个通过激光照射区时，仪器在两个角度测定激光的散射强度：高角度主要测细胞的折射指数（RI），它与细胞的密度有关；低角度主要测细胞体积的大小。血小板的体积在130fl，RI在1.351.40。微机对存储的测量信息进行分析处理，得出血小板计数结果。开、关机程序Hg以上 AC Line ＞ 90V 顺时针调节增加压力，逆时针调节减少压力。 3.2.4 查各计数池功能是否正常。 3.3 初始化 3.3.1 在稀释器键盘上按Start Up，开始自动开机测试。 3.3.2 观察测试的正常试剂流动。 3.3.3 查开机测试结果。 3.3.3.1 在中央命令栏选择QA → 日期显示每日开机测试结果。 3.3.3.2 采取适当措施解决未通过的项目 3.3.3.2.1 当试剂背景通不过时，确认试剂信息已被正确输入，更换过期的试剂。 3.3.3.2.2 当空白背景通不过时，执行背景测试或重新按Start Up，检查最近是否作了校准，这可能会影响开机测试结果。 3.3.3.2.3 当稀释器、分析仪、电源、信息传送、HGB电压或VCS通不过时，重新按Start Up。 3.3.3.2.4 当精密度测试通不过时，确认清洁后小孔被稀释液覆盖且计数池中没有清洁液，再重复精密度测试。 3.3.3.2.5 当斜率试验通不过时，确认清洁后小孔被稀释液覆盖且计数池中没有清洁液，再重复斜率测试。 3.4 关机 3.4.1 操作每日关机（每24h至少执行1次）：在稀释器键盘，按Shut Down，让清洁剂浸泡管道30min以上，再关掉工作站。 3.4.2 操作延长关机 3.4.2.1　按 Shut Down，让清洁剂浸泡管道30min以上。 3.4.2.2　将网织红细胞的管道从试剂中移开，用去离子水清洗外面的管道，并将管道放入去离子水中浸泡。 3.4.2.3　把其他管道从试剂容器中拿开，并把这些管道放进去离子水中浸泡。 3.4.2.4　按Shut Down用去离子水灌注清洁管道系统