白藜芦醇对亚硝酸盐的清除及亚硝胺阻断作用研究.doc

首页设计目 录 摘要 1 关键词 1 前言 1 1试剂和仪器 2 1.1试剂 2 1.2仪器 2 2 原理 2 2.1亚硝酸钠的清除率的测定 2 2.2阻断亚硝胺合成的原理 2 3实验方法 3 3.1溶液的配制 3 3.2 NaNO2 标准液的制备及吸光度的测定 3 3.3不同浓度白藜芦醇溶液在pH=3时对亚硝酸钠的清除率的测定 4 3.4不同浓度白藜芦醇溶液在pH=3时对亚硝胺合成的阻断率测定 4 4 结果及分析 5 4.1 NaNO2溶液的标准曲线的绘制 5 4.2不同浓度的白藜芦醇在pH=3时对亚硝酸钠的清除率及对亚硝胺的阻断率 5 5讨论及结论 7 致谢 7 参考文献 8 英文摘要 9 白藜芦醇对亚硝酸盐的清除及亚硝胺阻断作用研究 药物制剂 ：刘玉锋 指导老师 ：张孝林 摘要：目的：以亚硝酸盐的清除率和亚硝胺合成的阻断率为指标，研究不同浓度的白藜芦醇在酸性下对亚硝酸盐的清除和对亚硝胺合成的阻断作用。方法：分别配制0.1mg/mL、0.2mg/mL 、0.4mg/mL 、0.8mg/mL 、0.16mg/mL、0.32mg/mL和0.64mg/mL浓度的白藜芦醇溶液和5ug/mL亚硝酸钠溶液,在pH=3模拟胃酸条件下,采用分光光度法，分别测定不同浓度的白藜芦醇对亚硝酸钠的清除率及亚硝胺生成的阻断率[1]。结果：在酸性条件下，不同浓度的白藜芦醇对亚硝酸钠均有较强清除作用，在浓度小于0.32 mg/mL时随着浓度增大而增大，最大达到63.48%。同时对亚硝胺的生成有较强的阻断率，最大达到40.94%。结论：白藜芦醇对亚硝酸盐有很强的清除能力，对亚硝胺的生成有较强的阻断能力。 关键词：亚硝酸盐，白藜芦醇，分光光度法，亚硝胺，清除，阻断 前言 癌症是当前威胁人类生活的最大杀手, 根据世界卫生组织统计, 全世界每年约有 500万左右的人被癌症夺去生命。在致癌物中, 亚硝胺是最令人关注的一类化学致癌物质。亚硝酸盐作为一种发色剂和防腐剂[2]，在肉制品加工中得到了普遍的应用[3] 。许多蔬菜中天然含有的硝酸盐，在人体内通过细菌的作用也可被还原为亚硝酸盐。亚硝酸盐是合成亚硝胺的前体之一[4]，人体内的这些亚硝酸盐在一定条件下可以与食物中的仲胺、叔胺等形成亚硝胺。N-亚硝基化合物是一种致癌性很强的化合物[5]，已研究的近300种N-亚硝基化合物中，约90%以上具有动物致癌性，并证明N-亚硝基化合物可在体内外由前体物胺类与硝酸盐或亚硝酸盐形成[6]。在体内代谢过程中，特别是在胃液中容易形成亚硝胺[7]。因此，降低胃内的亚硝酸盐含量及阻断亚硝胺前提的合成 [7]从而达到防癌抗癌的目的是人类同癌症斗争的有效途径之一，而白藜芦醇在这方面的研究鲜见报道。 白藜芦醇(resveratrol，简称Res)是非黄酮类的多酚化合物，日本人Tokaoka 1940年首次从毛叶藜芦的根部分离得到。1963年Nonomura等提出白藜芦醇是某些草药治疗炎症、脂类代谢紊乱和心脏疾病等的有效成分。随着对白藜芦醇的深入研究，显示白藜芦醇具有抗癌、抗氧化、抗菌、抗炎以及预防食物过敏等作用，可广泛地应用于医药、保健品、食品、化妆品等领域。, 能与氨基苯磺酸重氮化后, 再与 N -1-萘乙二胺盐酸盐偶合生成红色的化合物，本实验通过测定相同条件下亚硝酸钠含量的变化来反映白藜芦醇对亚硝酸根离子的清除能力，并计算清除率： 清除率=( A 0 - A x ) / A0×100% A 0—没有加入白藜芦醇的亚硝酸钠溶液空白实验的吸光度值； A x—加入不同浓度白藜芦醇溶液时的反应液的平均吸光度值。 温度为37℃在pH=3的条件下，当用相同量的亚硝酸钠溶液同具有一定浓度梯度的白藜芦醇溶液反应后，再测量吸光度。吸光度越小，溶液中残存的亚硝酸钠含量就越小，表明白藜芦醇对亚硝酸盐的清除率越高；反之，表明白藜芦醇对亚硝酸盐的清除率越低。 2.2 阻断亚硝胺合成的原理[11] 二甲胺与亚硝酸钠在 37℃条件下, 可适宜地生成二甲基亚硝胺, 反应式如下: (CH3)2NH+NaNO2 HCl (CH3)2NH·NO + NaCl + H2O 其实质为: (CH3)2NH+HONO (CH3)2NH·NO + H2O 当往白藜芦醇溶液中依次加入二甲胺与亚硝酸钠时, 白藜芦醇优先同亚硝酸钠作用, 使得二甲胺不能与亚硝酸钠反应, 达到阻止二甲基亚硝胺生成的目的。据此可以比较相同条件下生成二甲基亚硝胺量的多少来反映白藜芦醇阻断能力的强弱, 生成二甲基亚硝胺量少, 白藜芦醇的阻断能力就强, 反之则弱。在紫外光照射下, 二甲基亚硝胺可分解成二甲基仲胺和亚硝酸根, 反应式如下: H2O + (CH3)2N-N=O 紫外光 (CH3)2NH2+ + NO2-