菊花的组织培养(崔彦慧)精要.ppt

课题1 菊花的组织培养 小结： 专题3 植物的组织培养技术 基础知识回顾： 1.植物组织培养的原理是 ： 2.细胞的全能性是指 ： 3.植物细胞具有全能性的原因是 ： 4.植物细胞表现全能性所需的条件有哪些？ 植物细胞的全能性 每个细胞都有发育成完整个体的全套遗传信息。 高度分化的细胞仍具有发育成完整个体的潜能 离体、无菌、植物激素 （请用文字和箭头的形式书写出来） 基础知识： 一、植物组织培养的基本过程 脱分化 再分化 离体的植物组织或细胞 愈伤组织 根、芽 完整的植物体 预习检测： （外植体） （特点：高度液泡化，呈无定形，薄壁细胞） 二、影响植物组织培养的因素 1．外植体的选择 （2）同一种植物的不同组织培养难度不同 （1）不同植物的组织培养难度不同 影响植物组织培养的因素有哪几个？ （3）菊花组织培养： 一般选择未开化植株茎上新萌生的侧枝 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 2．营养物质 大量元素： 微量元素： N、P、 S 、 K、Ca、Mg B、Mn、Cu、Zu、Fe、Mo、I、Co 有机物： （MS培养基） 你能说出各种营养物质的作用吗？ 提供植物细胞生活所必需的无机盐 大量元素、微量元素： 蔗糖： 提供碳源，同时维持培养基的渗透压 甘氨酸、维生素等物质： 主要是为了满足离体植物细胞在正常代谢途径受一定影响后所产生的特殊需求 3. 植物激素 二者的浓度、使用的先后顺序及用量的比例等 都会影响实验结果。 生长素和细胞分裂素 同时使用 先细胞分裂素，后生长素 先生长素， 后细胞分裂素 实验结果 使用顺序 有利于分裂， 但不分化 细胞既分裂 也分化 分化频率提高 比值适中 比值低时 比值高时 结果 生长素、细胞分裂素比值 促根分化， 抑芽形成 促芽分化， 抑根形成 促进愈伤组 织生长 4. 环境条件：pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度在18-22℃ 每日光照12h 5. 无菌环境 在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境 原因： （1）微生物生长快，会和培养物争夺营养。 （2）微生物在生长过程中会产生大量对培养物有害的物质，导致培养物迅速死亡。 制备 MS固体培养基 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 实验操作 冲洗—酒精—无菌水冲洗—0.1％HgCl—无菌水冲洗 1、制备MS培养基分几步？ 2、叙述外植体消毒的过程。 配制各种母液 配制培养基 灭菌 3、在整个操作过程中，是如何来实现无菌环境的？ （1）培养基的灭菌；（高压蒸汽灭菌） （2）外植体的消毒；（70％酒精、 0.1％HgCl ） （3）接种的无菌操作；（酒精、火焰灼烧灭菌） （4）无菌箱中的培养。 请认真阅读P34-35，解决以下问题 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养的基本过程 影响植物组织培养的因素 细胞分化 植物的细胞全能性 植物组织培养过程 外植体的选择 营养物质 植物激素 环境条件 MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培