性病的实验室检测及其意义精读.ppt

淋病的实验室诊断 淋病的主要实验室诊断方法 — 直接显微镜检查； — 分离培养淋球菌； — 非培养技术检测淋球菌细胞成份如抗原 或DNA（EIA, PCR/LCR） 显微镜检查的临床意义 男性尿道标本: 多形核细胞内见到形态典型的革兰阴性双球菌具诊断价值 敏感性及特异性：95%～99% 宫颈标本、无症状男性尿道标本 敏感性：40～70% 不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染。 如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需进一步培养确认。 淋球菌培养 淋球菌培养的的临床意义 淋病其它诊断技术 核酸检测的特点及临床意义 不依赖于活的病原体的存在，无需特殊运送条件； 敏感性高，不仅适合尿道或宫颈标本，还可以采用尿液、阴道标本； 不能进行抗生素敏感性试验； 用于判愈试验需在治疗后至少3 周以上进行. 沙眼衣原体感染的实验室诊断 细胞培养法 免疫层析快速抗原检测 酶联免疫抗原检测 核酸扩增检测 衣原体培养的临床意义 敏感性70％～80％ 特异性100％ 可用于判愈 可用于确诊 缺点 费时（需3～5天），费力，技术要求高 不宜作为临床常规检查 不宜用于大规模的筛查和流行病学调查 衣原体抗原快速检测的临床意义 衣原体核酸检测 现有的核酸检测方法 PCR LCR SDA TMA Real time PCR 优 点: 敏感性：-98％ 特异性: -99％ 缺 点： 实验室条件和技术要求高 成本高、费时、假阳性 生殖器疱疹实验室诊断 HSV实验室诊断的意义 临床诊断的准确性：50%～70%，通过实验室检测手段可帮助诊断 亚临床感染: 孕妇、性伴的检测等 进行HSV分型的意义 HSV-2是该病的主要病原体， HSV-1约占该病的30% 两型HSV感染的预后不同 生殖器疱疹实验室诊断方法 病原学诊断 －病毒检测 －抗原检测 －DNA检测 血清学检测-抗体检测 HSV血清学检测的意义 HPV-DNA检测的意义 梅毒螺旋体也称苍白密螺旋体苍白亚种(Treponema pallidum subspecies pallidum)，是一种小而纤细的螺旋状微生物，长5～15?m，直径约0.2?m，活体平均有8～14个规则的螺旋。 梅毒螺旋体透明而不易被染色，在普通显微镜下不易发现，只有在暗视野显微镜、免疫荧光或Fontana镀银染色等特殊染色下才能观察到。 梅毒螺旋体在体外不易生存，离开人体很快死亡，其生存最适温度为37℃。煮沸、干燥、肥皂水以及一般的消毒剂很容易将其杀死。 梅毒螺旋体不耐热，加热至42℃ 2个小时可将它杀死，100℃时立即死亡；但耐低温，在0℃时可存活48小时，置于-78℃数年仍具有传染性。 梅毒螺旋体尚不能在体外培养繁殖，人是其唯一的自然宿主。梅毒螺旋体可在家兔睾丸中生长繁殖，用于抗原制备和实验研究。 梅毒螺旋体传代时间为30～33小时，繁殖方式主要为横断分裂。 1998年完成了梅毒螺旋体全基因组测序。 梅毒螺旋体暗视野检查 原理 暗视野映光检查是采用一个特殊的聚光器，分为干系和湿系两种，其中央均为黑漆所遮蔽，仅在圆周边留有光线斜角处，光线只可从其圆周边缘斜角射到载玻片上。梅毒螺旋体检查一般采用湿系聚光器。倘若斜射光线遇到载玻片上的物体，如螺旋体等，物体会发光显现。本法检查梅毒螺旋体对于梅毒有病原学诊断的价值。 梅毒螺旋体暗视野检查 材料 暗视野显微镜、钝刀（刮勺）、载玻片、注射器、注射针头、无菌等渗盐水。 梅毒螺旋体暗视野检查 取材 皮肤粘膜损害取材：首先在载玻片（厚度为1.0～1.2mm）上滴加50～100μL盐水备用。然后用棉拭子取无菌盐水轻轻擦去皮损上的污物。如皮损上有痂皮，可用钝刀小心除去。再用钝刀轻轻地刮数次（避免出血），取组织渗液与载玻片上的盐水混匀，加盖玻片置暗视野显微镜下检查。 梅毒螺旋体暗视野检查 取材 淋巴结取材：消毒淋巴结表面皮肤，用无菌干棉球擦干。用1mL无菌注射器配12号针头，吸取无菌等渗盐水0.25～0.5mL，以无菌操作穿刺淋巴结并注入盐水，再吸入注射器内，反复2～3次后，取少量淋巴液于载玻片上，加盖玻片，置暗视野显微镜下检查 梅毒螺旋体暗视野检查 方法 在暗视野聚光器（此法用湿系暗视野聚光器）上加一滴甘油缓冲液（甘油和0.1mol/L PBS，pH 7.0按7:3配制）。 载玻片置载物台上，上升聚光器使甘油缓