任务3微生物的分离和纯培养技术三.pptVIP

3.平皿划线分离法 灭菌的培养基?无菌平皿?冷却凝固 划线?培养?单个菌落 接种环灭菌?无菌操作蘸取少量菌液 含菌数量多--分段划线法 含菌数量少--曲线、直线划线法。 四、单细胞（单孢子）分离法 从待分离的材料中挑取一个细胞来培养。 方法：从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养 以获得纯培养。 1. 利用选择培养基进行直接分离 利用各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素有不同的抵抗能力的特性，配制只适合某种微生物而限制其他微生物生长的选择性培养基，以获得纯种微生物菌种。 富集条件：根据所需分离的微生物的特点从物理、化学、生物及综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等等许多方面。 高温处理待分离的样品?芽孢菌 过滤去除丝状菌体保留孢子?霉菌 病原微生物?接种至宿主上 补充：接种方法 接种：用接种环或接种针分离微生物，或将纯种微生物在无菌操作条件下由一个培养器移植 到盛有已灭菌并适宜该菌生长繁殖所需要的培养基的另一器皿中。 1.接种要求：无菌条件下进行 2.接种工具：接种针、接种环、接种铲、无菌玻璃涂棒、无菌移液管、无菌滴管或移液枪等。 3.接种方法 (2)液体接种 斜面或液体菌种?液体培养基 (3)穿刺接种 用途：培养厌氧菌、检查细菌的运动能力或保藏菌种。 (４)平板接种 用接种环将菌种接至平板培养基上，或用移液管、 滴管将一定体积的菌液移至平板培养基上，然后培养。 目的：观察菌落形态、分离纯化菌种、活菌计数 方法：斜面接平板、液体接平板、平板接斜面 3.接种方法 微生物应用技术 学习情景三 培养微生物、测定其生长 主要内容 任务1 测定微生物生长 任务2 理化因素对微生物生长的影响 1 2 任务3 微生物的分离和纯培养技术 3 学习情景三 培养微生物、测定其生长 平板分段划线 培养后菌落 平板连续划线 培养后菌落 任务3 微生物的分离和纯培养技术 4.稀释摇管法 用途：培养对氧气更为敏感的厌氧性微生物 。 培养过程：先将一系列盛无菌琼脂培养基的试管加热使琼脂熔化后冷却并保持在50℃左右，将待分离的材料用这些试管进行梯度稀释，试管迅速摇动均匀，冷凝后，在琼脂柱表面倾倒一层灭菌液体石蜡和固体石蜡的混合物，将培养基和空气隔开。 结果：培养后，菌落形成在琼脂柱的中间 单菌落的挑取和移植过程：先用一只灭菌针将液体石蜡—石蜡盖取出，再用一只毛细管插入琼脂和管壁之间，吹入无菌无氧气体，将琼脂柱吸出，置放在培养皿中，用无菌刀将琼脂柱切成薄片进行观察和菌落的移植。 任务3 微生物的分离和纯培养技术 三、用液体培养基分离纯培养 微生物种类：细胞大的细菌、许多原生动物和藻类 过程：接种物在液体培养基中进行顺序稀释，使一支试管中分配不到一个微生物。大多数试管中没有微生物生长，有微生物生长的试管得到的培养物可能是纯培养物。 条件：必须在同一个稀释度的许多平行试管中，大多数(一般应超过95%)表现为不生长。 任务3 微生物的分离和纯培养技术 常用方法：稀释法 过程：用一台显微镜，在其上安装一个显微挑取器（单胞分离器），把一滴菌悬液置于载玻 片上，用显微挑取器的极细的毛细管 吸取视野中的一个单细胞，这样可得 到单细胞的纯种微生物。 特点：有一定的难度，限于高度专业化的科研中采用。 任务3 微生物的分离和纯培养技术 五、 选择培养分离 原理：某种微生物的生长需要是已知的，设计一套特定环境使之特别适合这种微生物的生长，能够从自然界混杂的微生物群体中把这种微生物选择培养出来。 依据：微生物的特点，包括营养、生理、生长条件等。 经过一定时间培养后使该菌在群落中的数量上升，再通过平板稀释等方法对它进行纯培养分离。 过程：选择培养分离的方法抑制使大多数微生物不能生长，或造成有利于该菌生长的环境。 任务3 微生物的分离和纯培养技术 五、 选择培养分离 任务3 微生物的分离和纯培养技术 途径： 培养基中加抗生素?分离某种抗生素抗性菌株。 培养基中加纤维素?富集纤维素分解菌。 五、 选择培养分离 2.富集培养 指利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅适应于该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离到所需的特定微生物。 任务3 微生物的分离和纯培养技术 五、 选择培养分离 2.富集培养 将待分离的样品进行预处理，以减少其它微生物的干扰。 任务3 微生物的分离和纯培养技术 六、 二元培养物 用二元培养物作为纯化培养的替代物 ，只有一种微生物的培养物