HE4作业指导书.doc

分析原理 采用双抗夹心法原理，整个过程18分钟完成。 第1次孵育：10μl标本、生物素化的HE4特异性单克隆抗体和钌复合体a标记的HE4特异性单克隆抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。 第2次孵育：加入链霉亲合素包被的磁珠微粒后，该复合体通过生物素与链霉亲合素的相互作用与固相结合。 将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell/ProCell M 除去。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。通过检测仪的定标曲线得到最后的检测结果，定标曲线是通过2点定标和试剂条形码上获得的主曲线生成的。 标本要求 血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。 Li-肝素，K2-和K3-EDTA血浆以及含有分离凝胶的Li-肝素血浆试管。判断标准：斜率0.9-1.1+截距≤±10 pmol/L，相关系数≥0.95。2-8℃可稳定保存48小时，15-25℃可稳定保存5小时，-20℃可稳定保存12周。样本可冻存两次。选用测试时市售样本收集试管检测所列出的测试样本，即并非检测了所有厂商的试管产品。各生产商提供的样本采集系统可能含有不同的材料，某些情况下这些材料有可能影响到检测结果。如果采用原始试管（样本采集系统）处理样本，请参照试管生产商提供的说明。如果样本中有沉淀，进行测定前离心。切勿使用加热灭活的标本。不可使用叠氮化物作为稳定剂的样本和质控品。检测前，请确保标本、定标液及质控液平衡至室温（20–25℃）。考虑到可能的蒸发效应，上机。 试剂、校准品、质控品和其他所需材料 采用罗氏原装配套试剂。 试剂： M ：链霉亲合素包被的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5 mL：包被链霉亲合素的磁珠微粒，0.72 mg/mL；防腐剂。 R1：生物素化的抗-HE4抗体(灰盖)，1瓶，10mL：生物素化的抗HE4单克隆抗体（小鼠），浓度0.75mg/L；磷酸缓冲液100mmol/L，pH6.5；防腐剂。 R2：Anti-HE4-抗体～Ru(bpy)3 2+（黑盖），1瓶，10 mL：钌复合体标记单克隆抗-HE4抗体(小鼠)1.5 mg/L；磷酸盐缓冲液100 mmol/L，pH7.4；防腐剂。 校准品：Elecsys HE4 CalSet 质控品：PreciControl HE4 其他所需材料： 常规实验设备 Elecsys E 170/E 411 Elecsys 系统清洗液（SysClean）,货利用ROMA（卵巢恶性风险算法）评估上皮卵巢癌风险： ? CA 125 II，100测试，货号11776223322， ? REF 11776240322，CA 125 II CalSet，4x1 mL ? REF 11776452122，PreciControl Tumor Marker，用于PreciControl Tumor Marker1和2，各2x3 mL ? REF 11732277122，Diluent Universal，2×16 mL样本稀释液或者 REF 03183971122，Diluent Universal，2x36 mL样本稀释剂 Elecsys E 170分析仪所需材料: Elecsys 系统缓冲液 （ProCell M）,货Elecsys 检测池洗液（CleanCell M）,货Elecsys PC/CC杯,货Elecsys 清洗液（ProbeWash M），货Elecsys 反应杯/加针头/废物袋（CUP/TIP），货Elecsys 系统清洗适配器（SysClean Adapter M），货 Elecsys E 411分析仪所需材料: Elecsys 系统缓冲液（ProCell），货 Elecsys 测量池清洗液（CleanCell），货 Elecsys 系统清洗液（SysWash），货 Elecsys 适配器 （Adapter for SysClean），货 Elecsys 反应杯（CUP），货 Elecsys 加样头（TIP），货 仪器和校准 使用仪器：罗氏公司生产Elecsys 2010/E 170/e601/e 411全自动电化学发光免疫自动分析仪 仪器校准：每批试剂必须用新鲜试剂和校准一次。另外，以下情况需要再次校准： 校准过期:批校准稳定28天，盒校准7天。 根据要求进行标定：如质控结果超出范围时；更换某些试剂时