盐酸精氨酸验证.doc

产品中盐酸精氨酸含量测定方法验证方案 QC- GTP7051(00)-2012 执行标准：国家GMP规范： 方法名称号：方式：1. 验证原则 2. 验证目的 3. 验证实验项目的概述 4. 验证的参数和接受标准 5. 验证内容 5.1 材料 5.2 分析方法 5.3 供试品溶液的制备 5.4 分析方法的验证 6. 验证结果 7. 验证结论 8. 偏离清单 9．再验证和风险评估 10. 评价与建议 1. 验证原则 本验证适用于采用新的检验方法、检验方法需变更的、采用药典及法定标准未收载的检验方法、法规规定的需验证的检验方法，该检验方法为药典未收载方法，所以进行方法再验证。 2. 验证目的 通过方法验证来证明该方法适合相应的检测要求。 3. 验证实验项目的概述 本法系根据盐酸精氨酸在硼砂缓冲液作用下与四氯苯醌发生荷移反应，在350nm波长下测定其吸光度，从而计算出样品中盐酸精氨酸含量。 4. 验证的参数和接受标准 4.4.1准确度：平均回收率： 98.0%-102.0% RSD（n=9）≤2.0% ;线性： R≥0.990 4.4.2精密度：重复性RSD（n=6）≤2.0% 4.4.3 专属性：人纤维蛋白原中加入甘氨酸，测定结果应无干扰 4.4.4范围：盐酸精氨酸含量在（3.0%-6.0%）范围内，平均回收率： 98.0%-102.0%，RSD（n=12）≤2.0% 4.4.5 耐用性：当实验反应温度发生变化，结果无明显变化。温度变化前后结果对比RSD（n=6）≤2.0% 5. 验证内容 5.1 材料 5.1.1供试品 品名：人纤维蛋白原（未添加盐酸精氨酸） 批号： 来源：本公司生产 贮藏条件：2-8℃ 5.1.2标准品 名称：人纤维蛋白原（未添加盐酸精氨酸） 来源：本公司 批号有效期：/ 含量：2.5%、3.5%、4.5%、5.5%、6.5% 贮藏条件：2-8℃ 5.2 分析方法 5.2.1试剂 名称 生产厂家 批号 盐酸精氨酸 四氯苯醌 硼砂 5.2.2试剂配制 5.2.2.1 10mg/ml盐酸精氨酸标准贮备液的制备 精确称取经105℃干燥至恒重的盐酸精氨酸1.0g，加纯化水溶解，并准确稀释至100ml。 5.2.2.2 0.1%四氯苯醌醇溶液 精密称取四氯苯醌0.1g，加无水乙醇溶解，并准确稀释至100ml。 5.2.2.3 硼砂缓冲液(pH9.18) 5.2.3仪器 仪器名称 生产厂家 型号 编号 是否确认或校验 722分光光度计 5.2.4实验器皿 容量瓶、15ml具盖玻璃离心管若干、刻度吸管、移液管、5ml刻度吸管、移液器 5. 供试品溶液的制备 5.3.1准确度测定样品的制备 5.3.1.1 标准管的制备 （1）.S1取盐酸精氨酸标准液1.0ml,用水准确稀释至50 ml，即为200μg/m （2）.S2取S1　6ml加水2ml，即为150μg/ml （3）.S3取S1　5ml加水5ml，即为100μg/ml （2）.S4取S3　5m加水5ml，即为50μg/m 5.3.1.2 待检样品管的制备 1. 称取盐酸精氨酸1.75g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成3.5%盐酸精氨酸溶液，即得样品1； 2. 称取盐酸精氨酸2.25g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成4.5%盐酸精氨酸溶液，即得样品2； 3. 称取盐酸精氨酸2.75g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成5.5%盐酸精氨酸溶液，即得样品3； 准确度测定用样品1 、2和3分别制备3份。 5.3.2精密度测定样品的制备 1.称取盐酸精氨酸1.75g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成3.5%盐酸精氨酸溶液； 2.称取盐酸精氨酸2.25g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成4.5%盐酸精氨酸溶液； 3.称取盐酸精氨酸2.75g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成含5.5%盐酸精氨酸溶液； 5.3.3专属性测定样品的制备 样品1制备 称取盐酸精氨酸1.75g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成3.5%盐酸精氨酸溶液①； 样品2制备 称取甘氨酸0.3g，取盐酸精氨酸溶液①稀释至10ml，配成含3%甘氨酸溶液； 专属性测定用样品1和2分别制备3份。 5.3.4范围：验证该方法适用的高低限浓度的区间。 样品溶液的制备 1.称取盐酸精氨酸1. 5g，取未加盐酸精氨酸人纤维蛋白原稀释至50ml，配成3.0%盐酸精氨酸溶液； 2.称取盐酸精氨酸2.0g，取