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细菌详细裂解步骤
超声——酶解法
1细菌培养及收集
活化细菌，LB固体培养基活化培养24h，挑取单菌落接种液体培养基12h，收 集 菌 悬 液 ，4℃12000g 离心 10min，弃上清液，细菌沉淀悬于生理盐水中，于 600nm
波长处测定其吸光度值（A600），调整菌悬液吸光度 A600 0.52，浓缩 10,20，30，40 倍后将菌悬液分装于离心管中，每管 1m L，4℃ 12000g离心 10min，弃上清液，细菌沉淀于 - 20℃保存备用
2 超声波破碎菌体
取保存的细菌沉淀，用生理盐水清洗2-3次，取菌悬液1ml，加入20ul溶菌酶（50mg／ml），37℃水浴锅恒温反应一小时，采用超声法裂解细菌，超声功率 300~350W，工作 9.9s，间歇 9.9s，循环 152 次，冰浴。超声结束后立即取 10μL 菌悬液，涂片进行革兰染色，显微镜下观察细菌破碎程度。
3 提取菌悬液蛋白
剩余菌悬液于 4℃ 16060g 离心 10min，收集上清液。
Tris-Hcl 0.01mol\L PH7.4
柠檬酸 20mM
MnSO4 30mM
NADP 20mM
溶菌酶 50mg ml
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