高精料日粮对奶牛肝脏氨基酸代谢的影响.doc

高精料日粮对奶牛肝脏氨基酸代谢的影响-校样稿 姜发彬，袁庆启，王亚琼，沈向真，庄苏 （1.南京农业大学动物科技学院，江苏 南京 210095；2.南京农业大学动物医学院，江苏 南京 210095） 摘要：研究高精料日粮条件下奶牛肝脏氨基酸代谢分配的规律。选择6头泌乳期中国荷斯坦奶牛（体重550±20 kg）作为试验动物，采用交叉试验设计，试验动物随机分成两组并提供不同精料水平的饲粮，分别手术安装瘤胃瘘管和门静脉、肝静脉、股动脉慢性血管瘘用于收集试验样本。在采样期，分别在采食前(0 h)以及采食后2、4、6、8 h采集门静脉、肝静脉、股动脉的血液用于血浆中氨基酸的浓度测定。结果表明： 高精料日粮显著增加门静脉血浆中蛋氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、苏氨酸、缬氨酸和组氨酸等必需氨基酸（EAA）以及丝氨酸、甘氨酸、丙氨酸、酪氨酸、天冬氨酸和精氨酸等非必需氨基酸（NEAA）的浓度（P0.05），提高门静脉血浆中支链氨基酸（BCAA），总必需氨基酸（TEAA），总非必需氨基酸（TNEAA）以及总氨基酸（TAA）的浓度（P0.05）。除了亮氨酸和苏氨酸，高精料日粮组肝静脉血浆中其他EAA的浓度显著高于低精料日粮组（P0.05）。高精料日粮显著肝静脉血浆中酪氨酸和天冬氨酸和BCAA、TEAA以及TAA浓度（P0.05），以及趋向增加苏氨酸、精氨酸浓度（P=0.08）。相比于低精料日粮，高精料日粮均显著增加股动脉血浆中除亮氨酸外其它EAA浓度（P0.05）；对于非必需氨基酸（NEAA）而言，高精料日粮组股动脉血浆中酪氨酸、天冬氨酸和精氨酸浓度显著高于LC组（P0.05）。高精料日粮显著提高股动脉血浆中BCAA、TEAA和TAA浓度（P0.05），但对TNEAA浓度没有显著影响（P0.05）。 关键词：奶牛; 高精料; 肝脏; 氨基酸 中图分类号：S823.9 文献标志码：B 文章编号： 反刍动物的蛋白质供应主要依靠日粮中粗蛋白的降解以及瘤胃中微生物合成的蛋白，这些蛋白对于动物机体的维持、生长和泌乳的需要有重要的作用。饲料蛋白经胃肠道消化后转变成游离的氨基酸，这些氨基酸随血液汇集于门静脉进入肝脏。肝脏是氨基酸主要的代谢器官，它不仅能分解、转化门静脉吸收的氨基酸（amino acids, AA），也能合成外周组织所需的蛋白质；同时肝脏糖异生作用也能够利用AA作为前体物[1-2]。日粮组成以及动物生理状态都能够影响AA在肝脏中的转化效率和代谢情况。研究表明，奶山羊日粮中粗蛋白水平的的增加能够提高肝脏门静脉血浆和动脉血浆的AA流量[3,4]；当反刍动物处于泌乳期，AA在肝脏中分解和合成代谢也会发生改变[5]。但关于高精料日粮对肝脏AA代谢情况的研究较少。本试验以泌乳中期奶牛为试验动物，提供不同精料水平日粮，以期对反刍动物肝脏氨基酸的基础代谢情况有进一步的了解。 1 材料与方法 1.1 试验动物及日粮 选择6头（体重550±20 kg）安装永久性瘤胃瘘管和门静脉、肝静脉及股动脉血管瘘[10] 的健康泌乳中期奶牛为研究对象。每日在6:00，12:00和18:00三次饲喂并挤奶（6:00、18:00），动物自由饮水。以玉米、豆粕、燕麦青贮、苜蓿干草及羊草为主要原料配制精粗比为6:4（高精料组）和4:6（低精料组）两种水平日粮，日粮组成及营养水平见表1。 注：① 预混料为每千克日粮提供：维生素A 7500IU，维生素D 1250 IU，维生素E 18 mg，烟酸 25 mg，铜14 mg，铁56 mg，锌96 mg，锰40 mg，碘1.2 mg，硒0.3 mg，钴0.6 mg。 ② 净能根据NRC计算而来, 其余均为实测值。③NFC(%)＝100-NDF-CP-Fat-Ash. 1.2 试验设计 本试验采用交叉设计设计。试验动物被随机分为2组，每组3头；试验共分为2期，每期18 d，包括预试期15 d，采样期3 d。 1.3 样品采集 血样采集：在采食前（0 h）与采食后2、4、6、8 h分别从门静脉、肝静脉、股动脉血管插管中抽取血液5 mL，血样用肝素钠（3.6 U/mL血）进行抗凝处理后迅速转移至实验室， 在4℃下以4 000 r·min-1离心15 min，制取血浆，血浆于-20 ℃下保存用于后期分析。记录早晚两次的产奶量，以此计算日均产奶量。乳成分含量测定使用Julie Z9 乳成分自动分析仪。 1.4 氨基酸的测定 混合氨基酸标准浓度的测定：取1 mL氨基酸标准溶液于氨基酸进样瓶中，在血浆样品分析前测定（日立-8900氨基酸自动分析仪）。 血浆样品处理：取血浆样品200 μL与50 g/L的磺基水杨酸按1:1体积比混合，涡旋混匀后于4 ℃冰箱静置15 min，然后在4℃条件下以20000 r/min、离心20 min，最后用1 mL 一次性注射器