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不同成脂条件下人骨髓间充质干细胞的早期成脂特性
田健健1,池 颖1,宋宝全1,杜文静1,韩之波1,韩忠朝1,2(1中国医学科学院、北京协和医学院血液学研究所血液病医院,实验血液学国家重点实验室,天津市 300020;2细胞产品国家工程研究中心,天津市 300457)
引用本文:田健健,池颖,宋宝全,杜文静,韩之波,韩忠朝. 不同成脂条件下人骨髓间充质干细胞的早期成脂特性[J].中国组织工程研究,2016,20(23):3366-3373.
DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.23.003 ORCID: 0000-0003-2660-0402(田健健)
文章快速阅读:
文题释义:
共同前体细胞:骨髓中获得的间充质干细胞,在体外具有增殖和多向分化的能力,被认为是成骨和成脂分化的共同前体细胞。成脂和成骨过程被认为存在着一种平衡,即向成骨分化的同时抑制了成脂分化。该过程受到多种信号通路的共同作用,但最终都表现在对主要转录因子的调控上,包括PPARγ和Runx2。它们分别被认为是成脂和成骨的管家基因。
脂肪因子:脂肪组织在体内不仅起到贮存能量的作用,而且可以作为内分泌器官分泌多种生物活性成分。这些由脂肪细胞产生的生物活性分子称为脂肪因子,包括PPARγ,FABP-4,adiponectin,leptin等。它们不仅通过自分泌和旁分泌作用影响脂肪细胞的功能,而且可以分泌到血液中对能量代谢、免疫防御、成血管和脂肪代谢产生作用,以此维持机体平衡。
摘要
背景:目前骨髓间充质干细胞的成脂诱导方法众多,其主要诱导成分包含吲哚美辛或罗格列酮。各种方法均能诱导骨髓间充质干细胞成脂分化,但其成脂诱导效率和机制尚缺少相互对比。
目的:比较不同成脂诱导方法对人骨髓间充质干细胞的早期成脂效果,并探讨其成脂诱导差异的可能机制。
方法:分离培养人骨髓间充质干细胞,通过油红O染色和成脂相关基因检测,比较3种不同诱导方法对人骨髓间充质干细胞的成脂效果。在诱导早期不同时间点(0,1,3,7 d)检测成脂相关基因PPAR,C/EBPα,Adiponectin,Leptin mRNA表达。Western blot检测成脂诱导第7天时PPAR、C/EBPβ蛋白表达,并比较DIMI,DIMR对PPARγ-Ser273位点磷酸化作用。
结果与结论:①油红O染色和成脂相关基因结果显示,在骨髓间充质干细胞成脂诱导分化第7天,DIMR组成脂效果明显强于DIM组和DIMI组;②Western blot示在成脂第7天,DIMI组PPAR、C/EBPβ蛋白表达量高于其他组,差异有显著性意义;③DIMR组PPARγ-Ser273位点磷酸化比例低于DIMI组;④结果表明,含罗格列酮的成脂培养基DIMR对人骨髓间充质干细胞的早期成脂诱导作用最强,且该作用可能与减少PPARγ-Ser273位点磷酸化有关。关键词:
roperties of human bone marrow mesenchymal stem cells in the early phase of adipogenic differentiation in different culture systems
Tian Jian-jian1, Chi Ying1, Song Bao-quan1, Du Wen-jing1, Han Zhi-bo1, Han Zhong-chao1, 2 (1Hematonosis Hospital, Institute of Hematology, Peking Union Medical College Chinese Academy of Medical Sciences, State Key Laboratory of Experimental Hematology, Tianjin 300020, China; 2National Engineering Research Center of Cell Products, Tianjin 300457, China)
Abstract
BACKGROUND: There are various methods to induce adipogenic differentiation of bone marrow mesenchymal stem cells, and the main component for adipogenic induction is indomethacin or rosiglitazone. However, there is a lack of comparative study on the ind
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