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关于“酶的特性” 探究实验教学的改进 晋江季延中学 施茂庆 一、实验内容的改进 1、“比较过氧化氢在不同条件下的分解实验”说明了酶的高效性，可以增加一组实验说明酶的专一性，具体操作：假如将H2O2酶催化H2O2分解的实验作如下更改，实验结果又将如何呢？①更换酶──将猪肝研磨液换成淀粉酶。②更换底物──将H2O2换成淀粉液。并请1、2两大组的同学实验探究①，3、4两大组的同学实验探究②。 2、“pH对酶活性的影响”实验完成后，可能继续做“pH由过酸、过碱恢复到中性，酶的活性是否恢复？”实验，具体操作：“pH对酶活性的影响”实验 取三支试管编号 1 2 3 分别加入H2O2 2mL 2mL 2mL 分别加入1mL（摇匀） 蒸馏水 HCl NaOH 分别加入猪肝研磨液 2滴 2滴 2滴 实验结果 实验结论 在此基础上，讨论并回答。学生回答的方案可能有如下两种：① 将1试管与3试管混合。②往2试管中加1mLNaOH，往3号试管中加1mLHCl。 3、完成“温度对酶活性的影响。”后，探究“低温、高温下的酶恢复到正常温度，酶的活性是否能够恢复？” 二、“比较过氧化氢在不同条件下的分解实验”材料的改进 1、试管四支 带有单孔胶塞，在胶塞上另穿一细铜丝，铜丝的下端弯曲成水平的双圆环形成一个自制的反应匙，反应匙上可放浸有H2O2酶的滤纸片，利用铜丝的上下活动控制反应时间。 、移液管、镊子、水槽、10 mL量筒、25 mL量筒等；反应物为30％H2O2。 实验中需要制作 H2O2酶滤纸片，制作方法是：将 10 g鲜肝剪碎，置于研钵中充分研磨，加入200 mL蒸馏水制成鲜肝液。然后，将5张滤纸叠加剪成5张大小相同面积大2 cm2的小片，平展在表面皿中，用鲜肝液浸泡l min后使用。 配制缓冲液：将17.96 g Na2HPO4·7H2O在 1 000 mL容量瓶内溶于蒸馏水中，加水至刻度，配制成0.067 mol／L Na2HPO4溶液。将9.07 g KH2PO4在1 000 mL容量瓶内溶于蒸馏水中，加水至刻度，配制成0.067 mol／L KH2PO4溶液。然后按下表用上述两种溶液配制pH 5、pH 6、pH 7、pH 8缓冲液. pH 5 6 7 8 物质的量浓度为0.067 mol/L的Na2HPO4溶液 mL 1 20 60? 95 物质的量浓度为0.067 mol/L的K2HPO4溶液（mL） 99? 80 40 5 实验步骤: 在多方查阅资料和师生共同实践探索我们设计出现有实验装置 如右图 ，该装置左侧的试管用来完成酶催化H2O2 的分解反应，右侧的量筒用来计量排水后收集的氧气的量。在此基础上制定出简单易行的且效果好的实验步骤如下： l）向水槽中加水至将满为止； 2）将大小相同的5片滤纸片在鲜肝液中浸泡l min，然后用镊子夹起滤纸片，靠在培养皿壁上，使多余的酶液流尽；3）用5mL量筒向试管中加入 pH＝5的缓冲液 2 mL，然后再用移液管加入 2 mL 30％的H2O2溶液，用镊子将1片酶滤纸片小心地放在用铜丝自制的反应匙上。注意滤纸片不要碰到反应试管壁，将软胶塞塞紧试管口； 4）将25 mL量筒横放于水槽中使之灌满水，若有气泡，将其轻轻倾斜，小心赶出气泡。将量筒倒立，使筒口一直处于水中； 5）将自制铜丝反应匙下降到试管内液面下，使H2O2溶液接触酶滤纸片。同时开始计时，在 30 S时，用钢丝荚导气皮管，将导气管从量筒中拿出，松开钢丝荚，读取量筒水平面刻度并作出标记后记录。 6）取新的干净试管，重复上述实验过程，测量在 pH 6、pH 7、pH 8时过氧化氢在酶的催化下所释放的气体量。 注意：所有的实验中都要严格保证干净，不应该有上一次反应后的剩余溶液，每次试验完后，应充分冲洗量取缓冲液的量筒、自制反应匙 至少三次 ，然后用相应的缓冲液再冲洗一遍。量取H2O2溶液的移液管不用洗 1.4 实验结果记录表： 结果记录 第1次PH 5 第2次PH 6 第3次PH 7 第4次PH 8 ?释放氧气量 ML 装置图如下： 有氧呼吸装置1 无氧呼吸装置1 ②较好方法：在装有质量分数为10%的NaOH溶液锥形瓶与装有酵母菌培养液的A瓶之间增加一个澄清的石灰水瓶，用来检验是否还有CO2。装置图如下： 有氧呼吸装置2 ③更好的方法：A瓶连接装有适量MnO2的锥形瓶，上面用装有过氧化氢分液漏斗连接制造O2，来替换含有质量分数为10%的NaOH溶液锥形瓶，其余装置不变。避免用人工打气50min,也不用放到25～30℃的环境中培养8～10h.既节约时间又能保证有氧条件，防止无关变量的影响，效果很好。 氧条件下酵母菌细胞呼吸选“③更好的方法”，见有氧呼吸装置图3；无氧条件下酵母菌细胞的呼吸更好的方法是：在B