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专题4 酶的研究与应用 课题1 果胶酶在果汁 生产中的作用 (一)细胞壁的结构及作用: 作用是什么? 特点? 结构组成? 四、实验设计 (1)探究温度和pH对酶活性的影响 (1)探究温度和pH对酶活性的影响 2、实验操作步骤: ⑴制备水果泥 ⑵配制果胶酶 ⑶水果泥与果胶酶分别水浴保温 ⑷将水果泥和果胶酶混合保温 ⑸过滤出果汁 ⑹记录果汁量 ⑺改变不同的温度/PH后重复以上实验 (1)探究温度和pH对酶活性的影响 3、设计记录数据的表格 4、得出结论与分析: 画曲线图;最适温度/PH是…… 分离血红蛋白溶液 装配好的凝胶柱 收集得到的纯化后的蛋白 1、概念:在一定的范围内,能对抗外来少量强酸、强碱或稍加稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用,具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。 ㈡ 缓冲溶液: 2、作用: 能够抵制( )对溶液( )的影响,维持PH基本不变。 外界的酸或碱 pH值 2、配置培养基 分装到锥形瓶中,每瓶分装50ml或100ml ① 配制培养液 ② 调PH ③培养基的分装 由于菊花的茎段的组织培养比较容易,因此不必添加植物激素 3、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸汽灭菌 1、选材:菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝 (二)外植体消毒 2、消毒 ①流水冲洗 菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉,用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右 ② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动2-3次,持续6-7s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗 ③消毒液处理 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1-2min,取出后在无菌水中至少清洗3次,漂净消毒液 (三)接种 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子,接种室消毒是至关重要的。用70%的酒精喷雾使空气消毒, 酒精或新洁尔灭搽洗工作台并用紫外线照射20分钟 1、接种室消毒 2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成,每次使用器械后,都需要用火焰灼烧灭菌,接种后立即盖好瓶盖。 3、材料的切取和接种 4、接种注意事项 ①每接种一块外植体前,镊子需放入体积分数为70%的酒精溶液中消毒一次,然后在酒精灯火焰上烧一遍,冷却后再接种 ②外植体在培养基中要分布均匀,放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定,一般胡萝卜3-4块,菊的茎或叶6-8块,也不要太少,以充分利用培养基中的营养成分和光照条件 ③插入时应注意方向,不要倒插。茎段、茎尖基部插入培养基利于吸收水分和养分 思考:你打算做几组重复?你打算设置对照实验吗? 答:每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶,与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格,没有被杂菌污染。 (四)培养 接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养。培养期间应定期消毒。培养温度18~22℃,每日用日光灯光照12h (五)移栽 移栽生根的菊花试管苗之前,应先打开培养瓶的封口膜,让试管苗在培养间生长几日 1、打开封口膜 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基,将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间 (六)栽培 3、移栽 珍珠岩:固体基质型,含水量高、蓄水性强、透性好,适合栽培 幼苗长壮后,移栽到土壤中 幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况,适时浇水、施肥,直至开花 一、课题目标 1.简述果胶酶的作用; 2.检测果胶酶的活性; 3.探究温度和pH对果胶酶活性的影响以及果胶酶的最适用量; 4.搜集有关果胶酶应用的资料。 二、课题重点与难点 课题重点: 温度和pH对果胶酶活性的影响。 课题难点: 果胶酶的最适用量。 三、基础知识分析 知识要点: 1.果胶酶的作用; 2.酶的活性的定义; 3.影响酶活性的因素; 4.果胶酶的用量。 保护植物细胞;支撑植物细胞 弹性小;全透性 纤维素、果胶 1.果胶 植物细胞壁及细胞之间胞间层的成分 植物细胞壁以及胞间层的主要组成成分之一,它是由半乳糖醛酸聚合而成的一种高分子化合物,不溶于水。 果胶: 在果汁加工中,果胶不仅会影响出汁率,还会使果汁浑浊。果胶酶能够分解果胶,瓦解植物细胞的细胞壁及胞间层,使榨取果汁更容易,而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸,也使得浑浊的果汁变得澄清。 果胶酶 果胶酶并不特指某一种酶,而是分解果胶的一类酶的总称,包括

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