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铁皮石斛组织培养研究进展组织培养
铁皮石斛组织培养研究进展
1、1 种子萌发1.2?基本培养基铁皮石斛种子在N6,改良N6,MS , 1 / 2 MS , SH 、KS 、VW 、KundsonC , 1 / 2N6,White等培养基上均可萌发。赵天榜等比较风、MS 等14 种培养基对铁皮石斛种胚成苗率的影响,除残外,所有的基本培养基均优于其减半培养基,其中以N6最好,SH 、Kn 、MS 次之,l /2MS 、1 / 2 Vw 最差。曾宋君等田将铁皮石斛种子在SH 、改良N6、MS 、KS 、VW 、KundsonC 培养基中培养,得出最适培养基为改良N6或自制PT 培养基。罗吉凤等比较了*** / 2MS 、1 / 2 N6和White 培养基对铁皮石斛种子萌发的影响,30d?种子发芽率均达到95 % ,但1 / 2MS 培养基上所萌发的原球茎较大。1.3 激素在培养基中添加一定浓度的NAA 可促进种子的萌发,浓度以0.2 一0.5mg/L最适合胚的萌发和生长,过高起抑制作用。2 , 4-D对胚的萌发起抑制作用。6 一BA 对胚萌发后的生长起抑制作用。KT 、IAA对胚萌发和成苗的影响不大,当浓度超过1mg/L 时,对胚萌发和成苗起抑制作用。ABA 有抑制种子萌发和抑制植物生长的作用,但张铭等发现ABA 能显著提高铁皮石斛原球茎的质量,浓度以0.5mg/L为最佳。1.4 天然添加物在培养基中添加适量的马铃薯汁、香蕉汁、椰乳可促进铁皮石斛种胚的萌发,但张玲等认为香蕉提取物和椰乳对种子萌发和正常发育有不利影响,干扰其正常发育过程。1.5 炭源在组培过程中适当添加活性炭,可以吸附代谢过程中产生的废弃物,防止组织褐变,并刺激胚胎的发生与生根,可加人2 %蔗糖。曾宋君等在改良N6+NAA 0.2mg/L 的最适培养基上,发现以白糖、片糖为炭源时,胚萌发和成苗的效果比蔗糖好,这可能是白糖、片糖中含有适合胚萌发和成苗的矿质元素?2 原球茎增殖2.1?基本培养基铁皮石斛原球茎增殖可以1/2 MS,MS等作为基本培养基。张治国等研究了6 种不同培养基对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果表明,l /2 MS 是原球茎增殖的适宜培养基。2.2 激素适宜的NAA 、KT 、6 一BA 浓度对原球茎的增殖起促进作用。唐桂香等以1 / 2 MS 为基本培养基,发现BA 1.0mg/L和NAAO.lmg/L有利于原球茎诱导增殖。蒋林等叫研究表明,l / 2Ms + NAA1.0mg/L+ KTO.2mg/L比较适合嗓球茎的增殖。蒋波等以1 / 2MS 为基本培养基.添加BA 2.0mg/L + NAA0.5mg/L或6 一BA3.0mg/L + NAAO.5 mg/L的激素,原球茎的增殖系数较大。陈兆贵等认为原球茎增殖以MS + NAA1.0mg/L + 6 一BA1.0mg/L + KT1.0mg/L为最佳,35d 增殖倍数达到5 倍。2.3 天然添加物、对原球茎的增殖有较好的效果,但香蕉汁对原球茎的增殖有抑制作用。张治国等认为原球茎增殖时最好不添加任何天然提取物。2.4 炭源添加能使原球茎的增殖量显著增加,这可能是了某种不利于原球茎增殖的物质,浓度0.5 %~0.3 %。周根余等比较了不同炭源对铁皮石斛原球茎生长的影响,发现原球茎在蔗糖中生长最快,浓度3 % ,中其次,而中最慢。3 原球茎分化3.1?铁皮石斛原球茎分化可以1 / 2 MS, MS 等作为。张治国等比较了VW 、N6、l / 2MS 、B5、KC 等6 种基本培养基对原球茎分化的影响,发现6 种基本培养基附加提取液和植物激素后,原球茎均可分化,但以1 /2MS 培养基作为原球茎分化的基本培养基最适宜,叶色浓绿,出苗整齐,这与刘瑞驹等困的报道一致。3.2 激素培养基中添加BA 和NAA 后可加快原球茎分化的进程。张治国等报道了BA 和NAA 不同的组合及浓度对原球茎分化的影响,在分化前期(40d ) ,高浓度的BA 和低浓度NAA 组合,加快原球茎分化进程,1 一2 片叶的分化苗占50 %以上,以2mg/L BA 和0.2mg/L NAA 组合最好。培养到60d 后NAA 浓度高的组合,分化苗整齐.尤其是0.2mg/LBA 和2mg/LNAA 组合,小苗生长发育快。蒋波等报道以1 / 2 MS 为,添加BA2.O mg/L + NAAO.2 mg/L或BA3.Omg/L十NAAO.2mg/L的激素,有利于原球茎的分化。陈兆贵等以MS + NAA1.Omg/L + 6 一BAmg/L + KT1.0mg/L为培养基,45d 原球茎分化率达84 %。罗吉凤等认为原球茎分化适宜的培养基为1 / 2MS 十BA2mg/L+ NAA 0.2mg/L十IBAO.1mg/L+3%。唐桂香等研究发
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