高三生物一轮复习第三讲 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质.ppt

第二节 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 第二讲 组成细胞的分子 实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。 ①还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀 ②脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液→橘黄色（或红色） ③蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色 ④淀粉 + 碘液→蓝色 水浴加热 一、可溶性还原糖的检测： （1）原理：还原糖 + 斐林试剂 砖红色沉淀。 （2）选材：含糖量较高，颜色为白色或近于白色的植物组织。如苹果、梨等 （3）检测过程： 水浴加热 振荡混匀 50～65℃水浴 加热2min 2mL组织样液 刚配制的斐林试剂2mL 呈现浅蓝色 变成砖红色（Cu2O） 还原糖：含有半缩醛羟基的糖类，主要是葡萄糖、果糖和麦芽糖。蔗糖、淀粉和纤维素属于非还原糖。 观察溶液颜色变化：浅蓝色→棕色→砖红色 二、脂肪的检测 （1）选材：经浸泡去种皮的花生种子。 （2）检测过程： 制片 选取最薄的切片置于洁净的载玻片中央 制成临时装片：滴1?2滴蒸馏水，盖上盖玻片 染色：在薄片上滴加2?3滴苏丹Ⅲ染液，染色2?3min 洗去浮色：用吸水纸吸去染液，滴加体积分数为50%的酒精1?2滴 镜检观察：在低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察。 切片：花生种子（浸泡３－４h），去皮，将子叶削成薄片。 视野中有橘黄色颗粒 橘黄色小圆颗粒即为脂肪颗粒 脂肪 + 苏丹Ⅲ（或苏丹Ⅳ）染液 橘黄色（或红色） 注意事项 （1）若用花生种子作实验材料，必须提前浸泡3～4小时，浸泡时间短了，不容易切片，浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形，切片要尽可能的薄。 （2）染色后一定要用50%的酒精溶液洗去浮色（酒精能溶解苏丹Ⅲ），染色和洗浮色时间不宜过长。 三、蛋白质的检测： （1）原理：蛋白质 + 双缩脲试剂 紫色络合物 （2）选材：黄豆、鸡蛋清（稀释）、牛奶、豆浆 （3）检测过程： 2 ml组织样液 1 ml双缩脲试剂A液，摇匀 3-4滴双缩脲试剂B液，摇匀 观察颜色变化 紫色 无色 紫色 （创造碱性条件） （提供Cu2+） 双缩脲试剂B 3-4滴 双缩脲试剂A 1mL 2mL组织样液 在碱性条件（NaOH）下，蛋白质中的肽键（—NH—CO—）与Cu2＋作用生生紫色络合物。因此，操作时，应先加A再加B，且A多B少，如果B过量， Cu2＋的蓝色就会遮盖生成的紫色。 蛋白质的检测结果 注意事项 （1）如果用鸡蛋清作为材料，则必须进行充分稀释，否则反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不彻底，且试管不易洗刷干净。 　 （2）【双缩脲试剂】：A液：0.1g/mL NaOH，B液：0.01g/mL CuSO4。先加A液后加B液，且B不能过量，不需要加热。 （3）过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。 （4）先加入A液2ml，摇匀；再加入B液3-4滴，摇匀。 四、淀粉的检测： （2）选材：马铃薯匀浆 （1）原理：淀粉 + 碘 液 蓝色 （3）检测过程： 2 ml组织样液 2滴碘液 观察颜色变化 蓝色 鉴定物质 生物材料 所用试剂 颜色变化 还原糖 脂肪 蛋白质 淀粉 苹果、梨、白萝卜 斐林试剂 砖红色沉淀 花生种子 苏丹Ⅲ染液 苏丹Ⅳ染液 橘黄色 红色 豆浆、牛奶、鸡蛋清 双缩脲试剂 紫色 面粉、马铃薯匀浆液 碘液 蓝色 注：鉴定还原糖需加热；脂肪的鉴定不一定要用显微镜，要观察脂肪颗粒，则必须用显微镜。 斐林试剂与双缩脲试剂的比较 斐林试剂 双缩脲试剂 甲液 乙液 A液 B液 成分 0.1 g/mL NaOH溶液 0.05 g/mL CuSO4溶液 0.1 g/mL NaOH溶液 0.01 g/mL CuSO4溶液 鉴定物质 可溶性还原糖 蛋白质或多肽 添加顺序 甲乙两液等量混匀后立即使用（现配现用） 先加入A液1 mL，摇匀，再加入B液4滴（不能过量），摇匀 反应条件 50～65 ℃水浴加热 不需加热，摇匀即可 反应现象 样液变砖红色沉淀 样液变紫色 斐林试剂用的是甲液和乙液，须现配现用，混合均匀，水浴加热。双缩脲试剂用的是A液和B液，先加A液，后滴B液，不用水浴加热。