培训课件--微生物检验第九章 分枝放线菌.ppt

硫磺样颗粒(sulfur granule) 培养：厌氧或微需氧 气体环境：5％ CO2 营养培养基：脑心浸液琼脂平板 温度与时间：37℃，24～48h 菌落:灰白色蜘蛛状、不规则结节状或臼齿状菌落, 初分离(粗糙) 生化特性:溶血(-) 葡萄糖(+) 甘露醇(+) 吲哚(-) 过氧化氢酶试验(-) 微生物学检查 主要：硫磺样颗粒（脓汁,痰,分泌物） 有颗粒：压片镜检:菊花状排列的菌丝 无颗粒：分枝菌丝，断裂的菌细胞 必要：厌氧培养（缓慢，37℃培养2w以上） 诺卡菌属 1.需氧 2.含分枝菌酸 3.分布：土壤中，多数：非致病菌 4.致病菌： 星形诺卡菌（N. asteroides） 巴西诺卡菌（N. brasiliensis） 豚鼠诺卡菌（N. caviae） 生物学性状 形态：与以色列放线菌相似 革兰染色：阳性 抗酸染色：阳性 脱色时间延长 阴性(与TB区别) 硫磺样颗粒: 渗出液、痰或脓汁中有时可见淡黄、红色或黑色小颗粒。 营养要求：不高（沙氏或普通琼脂培养基） 气体环境：需氧，有气生菌丝 培养温度：室温或37℃ 生长速度：缓慢生长，约1周 色素：星形诺卡菌：黄色或深橙色，无白色菌丝 巴西诺卡菌：有白色菌丝 菌丝断裂： 5天后镜检可见链球状或链杆状 （放线菌属：24h开始) 培养特征：菌落：有皱褶、颗粒状 致病性 侵入途径：呼吸道或皮肤创伤 所致疾病：诺卡菌病（nocardiosis） 外源性感染 化脓性感染 肺部：肺炎、肺脓肿、肺空洞 脑部：脑脓肿、脑膜炎 其他：肾、肝、脾、心包等 （慢性肉芽肿，瘘管） 好发于免疫缺陷患者 微生物学检查 1.硫磺样颗粒压片 2.取痰、脑脊液、脓汁： 涂片 革兰染色及抗酸染色 3.分离培养：沙保弱或普通琼脂培养基 4.生化试验 分枝杆菌放线菌诺卡菌 Mycobacterium是一类细长略带弯曲的杆菌，含有分枝菌酸，有分枝生长的趋势而得名。具有抗酸性，故又称抗酸杆菌(acid-fast bacillus)。 人结核分枝杆菌 牛分枝杆菌 非洲分枝杆菌 第一节 结核分枝杆菌 荚膜： CR3结合、降解大分子物质、保护、 抑制溶酶体融合 脂质： 索状因子、磷脂、硫酸脑苷脂、蜡质D 蛋白质: 超敏反应、结核结节的形成 传播途径：呼吸道、消化道、损伤的皮肤 疾病：多种脏器的结核病，肺结核最为多见。 免疫性： 高感染率，低发病率。 抗体无保护作用 带菌免疫 细胞免疫 细长略带弯曲的杆菌，抗酸染色后结核分枝杆菌呈红色，背景呈蓝色。菌体外有荚膜。 专性需氧 改良罗氏培养基 生长缓慢 表面干燥、不透明的菜花样粗糙型菌落 液体培养时生成菌膜 抵抗力较强。耐干燥，在干燥的痰内生存6～8个月，对化学消毒剂的抵抗力较强，在3％HCl或6％H2SO4中不被杀死，对湿热敏感,在70％～75％乙醇中数分钟即被杀死。 结核分枝杆菌不发酵糖类，有毒株中性红试验均阳性，无毒株则为阴性，并失去索状生长现象。 H2O2 烟酸 硝酸盐 人型结核分枝杆菌 + + + 牛型结核分枝杆菌 +　 - - （1）Direct Smear 2.Morphologic Examinations 　 报告标准 - 全视野未找到抗酸菌 1+ 100个视野发现3～9个 2+ 100个视野发现10～99个 3+ 每个视野发现1～9个 4+ 每个视野发现10个以上 （2）浓缩集菌涂片检查法 如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌，应采用浓缩集菌涂片检查法，以提高结核杆菌的检出率。将标本离心，取沉淀涂片，或采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取3~4个接种环，干燥固定后染色镜检。 3.核酸检测 用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染,特异性与敏感性均大于95％。 ４.抗原检测：用ELISA法检测结核分枝杆菌抗原，可快速得知是否感染结核分枝杆菌． ５.抗PPDIgG的检测 用ELISA法检测患者血清中抗PPDIgG，可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法，阳性率为80％～90％。 ６.分离培养 专性需氧、罗氏培养基、8w 　 前处理 目的：去除杂菌，痰液均质化。 方法：挑取5ml痰液至已经标记的50ml离心试管中；加入等量的2% N-乙酰半胱氨酸-氢氧