培训课件--分枝杆菌检验.ppt

（四）分离培养与鉴定 1、分离培养 标本接种于选择性固体培养基中，常用罗琴培养基或青霉素血液琼脂培养基，所含的孔雀绿或青霉素可抑制杂菌生长，如果出现干燥呈颗粒状、灰白色菌落，涂片染色为抗酸阳性，多数是结核杆菌。 2、鉴定 (1)PCR反向膜探针杂交ELISA法(PCR杂交梳) (2)DNA探针 (3)16s rRNA基因序列测定 (4)高效液相色谱(HPLC)检测 (五)药物敏感性试验 将纯培养物菌悬液，接种含各种浓度药物的固体培养基上，同时做不含药物的对照组。经过培养，含有药物的培养基上菌落数目是对照组的75％以上，则认为该菌对该药物浓度为完全耐药，如无菌落生长则为敏感。 （六）免疫学诊断 1、结核菌素试验 原理：纯蛋白衍生物(PPD) 注入皮内后，如果受试者已感染结核，则结核菌素与致敏淋巴细胞特异性结合，形成迟发型超敏反应性炎症。 结核菌素试剂 旧结核菌素（old tuberculin，OT） 纯蛋白衍生物（PPD）: PPD-C、 BCG-PPD 方法： 皮下注射 皮肤划痕或点刺 皮内注射 以后者应用最为广泛，效果准确 ---分别取两种PPD 5单位注入两前臂皮内，48～72小时后观察。 结果分析 ≥15mm为强阳性－－可能有活动性结核病 红肿硬结超过5mm者为阳性 PPD-C侧 BCG-PPD侧 感染 PPD-C侧 BCG-PPD侧 卡介苗接种 红肿硬结小于5mm者为阴性反应 受试者处于原发感染的早期，T淋巴细胞尚未被致敏 老年人 患严重结核病或其他传染病（如麻疹等）的患者 获得性免疫功能低下，如艾滋病患者或使用免疫抑制剂治疗者 应用： ①选择BCG接种对象及测定接种效果； ②诊断婴幼儿结核病； ③在末接种BCG的人群中作结核分枝杆菌感染的流行病学调查； ④测定肿瘤病人的细胞免疫功能。 第二节 非典型分枝杆菌 指结核分枝杆菌和麻风分枝杆菌以外的分枝杆菌。因具有抗酸性，故又称非典型抗酸性菌。 广泛分布于外环境和人及动物的机体中。已发现17种以上能引起人类疾病，引起肺部感染。 —、光产色分枝杆菌 二、暗产色分枝杆菌 三、不产色分枝杆菌 四、迅速生长分枝杆菌 第三节 麻风分枝杆菌 麻风病的病原菌，麻风是一种慢性传染病，主要表现为皮肤、粘膜和神经末梢的损害。晚期可侵犯深部组织和器官，形成肉芽肿。 根据临床表现、免疫病理变化和细菌检查结果等将麻风分为瘤型、结核样型和界限类综合征等三种病型。 抗酸杆菌，呈束状或团状排列， G+无鞭毛、无荚膜和无芽胞。用药后细菌可断裂为颗粒状、链杆状等，着色不均匀，叫做不完全菌。 分枝杆菌是一类细长略带弯曲的杆菌，含有分枝菌酸，有分枝生长的趋势 而得名。因具有抗酸性，故又称抗酸杆菌。 第15章 分枝杆菌属 人结核分枝杆菌、牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌对人类致病。人型结核分枝杆菌感染的发病率最高。 由于结核分枝杆菌的耐药和AIDS发病率呈上升趋势，结核病成为危胁人类健康的一个严重的全球性公共卫生问题。 世界防治结核病日：3月24日 第一节 结核分枝杆菌 ?????? 据2000年全国结核病流行病学抽样调查结果显示，我国结核病疫情现状为：（1）结核病感染率高：目前全年龄组结核菌感染率为44.5%，全国约5.5亿人受到了结核菌感染，结核菌感染率高于全球人口感染率为1/3的水平。（2）结核病患病率高：全国活动性肺结核患病率为367/10万，涂阳肺结核患病率为122/10万，菌阳肺结核患病率为160/10万；估算全国现有活动性肺结核病人数450万，其中涂阳肺结核病人150万，菌阳肺结核病人200万。 我国结核病疫情现状 （3）结核病耐药率高：肺结核病人结核菌初始耐药率为18.6/10万, 继发耐药率为46.5/10万。按照全国菌阳肺结核病人200万计算，全国有耐药病人55.5万。（4）结核病死亡率高：全国结核病死亡专率为9.8/10万,每年因结核病死亡13万人，为各种其他传染病和寄生虫病死亡总和的2倍。 全球结核病疫情现状 ??????? 据世界卫生组织报道，目前全球有近1/3的人已感染结核杆菌，也就是20亿人口感染了结核菌。全球有活动性肺结核病人约2000万，每年新发结核病人约800-1000万，每年约有300万人死于结核病。结核病已成为全世界成人因传染病而死亡的主要疾病之一。我国是全球22个结核病高负担国家之一，活动性肺结核病人数居世界第二位。 上世纪末为什么全球结核病疫情回升 20世纪90年代