培训课件_生物安全动植物用转基因微生物的安全性.ppt

关于重组鸡痘病毒 S-FPV-017株病毒和重组病毒免疫鸡，表现相同的安全性，致病性没有增加 重组鸡痘病毒在鸡胚连续传10代，对鸡的毒力及免疫力没发生变异 （二）各阶段的安全性评价内容 申报中间试验、环境释放和生产性试验，申报单位需要提出进行安全性评价的试验内容，作为基因工程活载体疫苗，重点应对以下内容进行评价，并设计相关的试验方案 1、重组鸡痘病毒的稳定性（中间试验） 重组鸡痘病毒增殖的稳定性 重组鸡痘病毒外源基因（传染性喉气管炎病毒gB基因）的稳定性 外源基因在免疫鸡体内的表达和消长规律 应将重组鸡痘病毒在鸡胚成纤维细胞上进行传代，至少5代以上，检测重组鸡痘病毒的滴度 利用PCR技术检测经传代的重组鸡痘病毒的外源基因，同时用免疫荧光抗体技术或其它技术分析外源基因的表达情况 用重组鸡痘病毒免疫鸡，检测免疫鸡体内gB蛋白抗体水平，分析外源基因在免疫鸡体内的表达与消长情况 2、重组鸡痘病毒免疫鸡的安全性（中间试验） 用重组鸡痘病毒免疫鸡：（1）通过观察免疫鸡的临床反应情况分析免疫剂量接种对鸡的安全性；（2）分析对不同日龄鸡（特别是雏鸡）免疫的安全性；（3）观察高剂量接种对鸡的安全性 3、重组禽痘病毒在免疫鸡体内的存留时间 （中间试验） 通过检测免疫鸡的病毒血症和组织中的重组鸡痘病毒，分析重组鸡痘病毒在免疫鸡体内的存留时间 4、重组禽痘病毒的毒力返强能力（中间试验） 将重组鸡痘病毒在鸡（SPF）连续传5代，观察每代重组禽痘病毒对鸡的致病性，分析重组鸡痘病毒的毒力返强能力 5、重组禽痘病毒在免疫鸡和非免疫鸡间的排毒和传播能力（中间试验、环境释放） 检测免疫鸡的排毒情况和与非免疫鸡同居感染情况，分析重组鸡痘病毒免疫鸡的排毒和传播能力 6、重组禽痘病毒在免疫鸡群环境中的存活能力 （环境释放、生产性试验） 对免疫鸡在不同时间进行取样，检测免疫鸡群环境（水、土、垫料）中的重组鸡痘病毒，分析其在环境中的存活能力 谢谢各位！！！ 作业 1、以小组为单位讨论动物、植物用转基因微生物安全性。 2、课后学习笔记：①简要概述植物用转基因微生物可能的安全风险。 3、以小组为单位讨论兽用基因工程生物制品工业化生产可能的潜在危险（需举例说明）。 4、作业：结合微生物的特点，与转基因动植物对比，分析转基因微生物的生物安全风险（限300-500字数）。 （2）安全评价内容及其技术指标要求 安全性评价的总体内容 安全性评价的阶段及其要求 试验方案 主要动物用转基因微生物及其产品的安全性评价的相关技术资料 1、安全性评价的总体内容 受体微生物的安全性评价 与安全等级的确定 （1）所用受体微生物(包括细菌、病毒) 可接触到的环境 （2）受体微生物的生物学背景与特性 学名和分类地位，分布、繁殖方式 在环境中的定殖、存活和传播能力与途径及影响因素 致病性和产生毒素及毒性物质的能力， 在国内外的应用情况 （3）受体微生物对人类、动物和其它微生物的影响和 潜在的危险程度，受体微生物受人类和动物其它 病原体的侵染情况 （4）受体微生物对生态环境的影响和 潜在的危险程度 （5）受体微生物的质粒状况，发生遗传 变异的可能性及其潜在危险程度 （6）对受体微生物的监测方法 和监控技术 受体微生物的安全性等级按《农业转基因生物安全评价管理办法》（第二章）确定 基因操作的安全性评价 内容与等级确定 （1）目的基因的来源、结构、 免疫学与生物学功能和用途 （2）基因操作所用载体的名称、 来源、特性与结构、安全性，载体所带 的抗性标记基因及其特性 （3）重组DNA分子的结构、构建 方法、复制特性和安全性 （4）转基因方法 （5）目的基因在受体微生物及宿主 体内的表达及其遗传稳定性 基因操作的安全性等级按《农业转基因生物安全评价管理办法》（第二章）确定 转基因动物用微生物遗传工程体 及其产品的安全性评价内容 （1）转基因动物用微生物遗传工程体的分子学与生物学特性 （2）在自然界的存活能力 （3）遗传物质转移到其他生物体的能力和可能后果 （4）与其它病原微生物重组的能力和可能产生的后果 （5）遗传工程体的应用目的和范围 （6）对遗传工程体应有适当的监测方法和监控手段 遗传工程体及其产品对动物的安全性 在靶动物和非靶动物体内的生存前景 对靶动物和可能的非靶动物高剂量接种后的影响 与传统的产品相比较，其相对的安全性 宿主范围与载体的漂移度 免疫动物与靶动物以及非靶动物接触时的排毒和传播能力 遗传工程体回复传代时的毒力返强能力 对妊娠动物的安全性 对免疫动物子代的安全性 遗传工程体及其产品对人类的安全性 人类接触和感染的可能性及其危险性 广泛应用后对人类的潜在危险性 遗传工程体及其产品对生态环境的安全性 遗传工程体在环