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学科分类号(二级)180.51
本科学生毕业论文(设计)
题 目 矮壮素对马铃薯米拉
试管苗生长的影响
姓 名
学 号
院、 系 生命科学学院
专 业 应用生物教育
指导教师
职称(学历) 讲师(硕士研究生) 矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响
摘要:以MS为基本培养基,以马铃薯米拉的试管苗为实验材料,研究矮壮素对马铃薯米拉试管苗生长的影响。结果表明,在MS培养基中加入100mg/L的矮壮素能有效仰制马铃薯试管苗腋芽的萌发,可使试管苗节间长度变短、茎变粗、叶片浓绿,保持马铃薯试管苗的正常生长,有利于培养出健壮的试管苗,达到壮苗的目的,有效防止试管苗发生徒长和倒伏现象。
关键词:马铃薯试管苗;矮壮素;壮苗
马铃薯(学名:Solanum tuberosum),属茄科多年生草本植物,块茎可供食用,是全球第三大重要的粮食作物,仅次于小麦和玉米。马铃薯又称地蛋、土豆 、洋山芋等,茄科植物的块茎。是世界上种植和食用国家最多的作物,与小麦、玉米、稻谷、高粱并成为世界五大作物[1]。随着马铃薯生产的发展马铃薯茎尖脱毒离体培养[2]试管脱毒微型薯的诱导[3-5]等研究取得了很大的进展,很好地解决了由于病毒侵染积累品种严重退化的问题,并为大规模工厂化种苗繁育、品种资源的长期保存积累了经验,但频繁的继代培养过程中脱毒试管苗常常出现严重的徒长现象,不仅降低了有效繁殖倍数,而且影响到下一代扩繁。
矮壮素(CCC)是一种优良的植物生长延缓剂,又名稻麦立,它的化学名称为2-氯乙基三甲基氯化物。CCC是通过仰制赤霉素生物合成过程中GGPP→CPP的环节来使植物生长延缓的。可用于小麦;水稻;棉花;烟草;玉米及西红柿等作物[6-7],抑制作物细胞伸长,但不抑制细胞分裂,能使植株变矮,杆茎变粗,叶色变绿,可使作物耐旱耐涝,防止作物徒长倒伏,抗盐碱,又能防止棉花落铃,可使马铃薯块茎增大。
马铃薯品种米拉中晚熟品种,生育期从出苗到成熟105-115天左右。株型开展,分枝数中等,株高60cm,茎绿色基部带紫色,生长势较强,叶绿色。抗晚疫病,所以适于无霜期较长、雨多湿度大、晚疫病易流行的西南一季作山区。
本实验以米拉马铃薯试管苗作为材料,通过在MS培养基中加入不同浓度的矮壮素,研究不同浓度的CCC对米拉马铃薯试管苗生长的影响。达到马铃薯试管苗壮苗的目的,提高马铃薯的生产效率。
1、材料与方法
1.1实验材料
实验材料米拉(Mira)的脱毒试管苗有云南师范大学组织培养实验室提供。矮壮素采用四川国关实业公司的产品。
1.2实验方法
本次实验采用的是植物组织离体培养法,实验分为两个阶段,第一阶段是米拉脱毒试管苗的扩繁,第二阶段是加入不同浓度矮壮素对米拉试管苗的培养。
1.2.1培养基的配制
以MS培养基为基本培养基,以蒸馏水代替无菌水,加入不同浓度的矮壮素,PH值调至5.8,总共有6个矮壮素浓度梯度,每个梯度分装10瓶,分装到果酱瓶中,每瓶装50mL培养基,封口采用不透气封口膜,放入高压灭菌锅进行常规灭菌。试验中采用的6种不同矮壮素浓度的培养基列于表1。
表 1 含不同浓度矮壮素的培养基
处理 矮壮素(CCC)浓度水平(mg/L) 1(对照) MS+0 2 MS+20 3 MS+50 4 MS+100 5 MS+150 6 MS+200 1.2.2接种
从培养好的脱毒马铃薯米拉试管苗中选取大小均匀一致的试管苗,采用带一个叶片和腋芽的单节茎段,长度1厘米左右,将茎段腋芽朝上插在培养基上。总共6个处理,每个处理10瓶,每瓶接种5个茎段。整个过程在严格的无菌环境下进行。
1.2.3培养条件
将接种好的培养瓶放到培养室中进行培养,。培养室中的温度为25±1℃、光照时间为14h/d、光照强度为1000~1500lx。
1.2.4观察记录
每7天观察和记录一次马铃薯米拉试管苗的生长情况,及时清理和统计污染数,培养到40天时记录结果。记录每一株苗的分支数、根数和叶数(叶数只记录可见叶的数量),株高用直尺测量从培养基以上到茎尖的部分,选取苗的茎段中间比较均匀的部分用游标卡尺测量其茎粗。记录完分支数、根数、叶数、株高和茎粗这几个数据后,把苗去除其根部放到烘箱中烘干(先在105℃温度下处理30min,再在80℃温度下处理12h),烘干后用分析天平测量其干重,计算其干重和株高的比值。
2、结果与分析
在恒温培养室里培养40d后,不同培养基培养马铃薯米拉试管苗的生长情况如图1所示。其根数、叶数、株高、茎粗和干重/株高的平均值及其腋芽萌发情况的测定结果见表2。
图1不同
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