色谱仪器工作原理及使用注意事项学习内容.doc

色谱仪器工作原理及使用注意事项学习内容 1、色谱通常分为气相色谱、液相色谱、薄层色谱、纸上色谱、凝胶色谱、超临界流体色谱、单相色谱（均流分离）和多维色谱等。 2、色谱广泛应用于物质的分离、分析、浓缩、回收、纯化与制备。 3、色谱的分类方法有以下几种： （1）按两相状态分为： 气相色谱（气-固色谱、气-液色谱）； 液相色谱（液-液色谱、液-固色谱）； （2）按固定相性质分为： 柱色谱：填充柱色谱（包括吸附、分配、凝胶、离子交换等色谱）和开管柱（毛细管柱）色谱； 薄层色谱； （3）按分离原理分为： 吸附色谱； 分配色谱：液液分配（反相色谱，正相色谱），气液分配； 凝胶色谱（空间排斥色谱）； 离子交换色谱、离子对色谱离子色谱； 生物亲和色谱； （4）从动力学角度可分为： 冲洗法； 顶替法； 迎头法； （5）按使用领域分为： 分析用色谱； 制备用色谱； 流程用色谱。 4、气相色谱法基本原理：利用混合物中各组分在流动相和固定相中具有不同的溶解和解析能力（气-液色谱），或不同的吸附和脱附能力（气-固色谱），当两相作相对运动时，样品各组分在两相中受上述各种作用力的反复作用，从而使混合物中的组分得到分离，并依次离开色谱柱进入检测器，被记录仪分别记录色谱峰。 5、气相色谱法具有高选择性、高灵敏度、分析速度快、应用范围广的特点。 6、气相色谱仪组成：一台完整的气相色谱仪包括气路系统、进样系统、分离系统、检测系统、信号记录及数据处理系统。 7、气路系统关键因素： （1）载气及其净化： （2）载气流速的控制。 8、进样系统关键因素： （1）进样方式：气体样品进样、液体样品进样、固体样品进样、毛细管柱进样（分流进样、不分流进样、冷柱头进样、顶空进样和裂解进样）； （2）汽化室（进样口）：作用是将液体和固体样品瞬间汽化为蒸气，要求汽化室死空间小，热容量大，载气在进入汽化室与样品接触前经过足够的预热。 9、分离系统关键因素： （1）色谱柱：包括填充柱和开管柱两大类； （2）柱温控制：一般由柱温箱完成，要求控温范围要宽，控温精度要高，热容要小且保温效果要好，加热功率要大。 10、检测系统关键因素： （1）检测器：作用是把被色谱柱分离的样品组分，根据其物理的或化学的特性，转变为电信号（电压或电流）； （2）记录仪：量程足够，反应灵敏。 11、信号记录和数据处理系统：一般由积分仪、数据处理仪或色谱工作站完成。 12、气相色谱仪对检测器的要求： （1）稳定性好，敏感度高，便于进行痕量分析； （2）死体积小，响应快，可用于快速分析和接毛细管柱； （3）应用范围广，要求一个检测器能对多种物质产生信号，又能适应同一物质的不同浓度，线性范围宽，定量准确方便； （4）机构简单、安全。 13、气相色谱仪检测器的关键性能指标： （1）灵敏度； （2）敏感度； （3）线性范围； （4）稳定性。 14、气相色谱仪常用检测器：热导池检测器（TCD）、氢火焰离子化检测器（FID）、电子捕获检测器（ECD）、火焰光度检测器（FPD，脉冲火焰光度检测器PFPD）、热离子检测器（TID）、光离子检测器（PID）。 15、高效液相色谱法简写为HPLC，具有应用范围广、分离效能高、分离速度快、分离时间短、分析灵敏度高、测定精度高等特点。 16、高效液相色谱仪一般由贮液槽、高压泵、梯度流洗装置、进样器、色谱柱（与柱箱）、检测器、显示器以及数据处理系统等装置组成。 17、高效液相色谱仪高压泵的关键因素： （1）流量恒定并能进行调节； （2）压力稳定，无脉动，以保证基线的稳定； （3）泵及输液系统具有耐腐蚀性，可以适应各种溶剂的输送； （4）泵的滞留体积小，操作和维护方便。 18、高效液相色谱仪进样器的关键因素： （1）在进样过程中，对于柱上的压力和流量不应产生影响； （2）进样量准确并易于改变。 19、高效液相色谱仪柱箱的关键因素： （1）体积和结构易与其它装置搭配； （2）控温稳定、准确； （3）有合适的内腔容积和色谱柱固定支架，保证色谱柱放入后管路无硬性折弯，色谱柱固定无振动； （4）操作简单，易于清洁。 20、高效液相色谱仪对检测器的要求： （1）具有灵敏度高、检测限低、线性范围宽、重现性好、噪声低、漂移小、响应快的特点； （2）对待测组分敏感，而不受温度和流动相流速变化的影响； （3）检测器的液槽体积与连接管及其配件的直径应尽可能的小，以致不会引起谱带柱外扩展，而且连接处应密封，不能漏气； （4）对样品的适应性强，选择性强； （5）使用方便，性能可靠。 21、高效液相色谱仪检测器的关键因素： （1）灵敏度； （2）敏感度； （3）线性范围； （4）稳定性。 22、高效液相色谱仪常用检测器：紫外-可见吸收检测器（UV-VIS）、示差折光检测器、荧光检测器、电化学检测器、化学发光检测器、电导