中国ALK阳性非小细胞肺癌诊断专家共识.ppt

* * * * * * jd228 * * 肿瘤细胞中存在很强的颗粒状胞浆染色（任何百分比的阳性肿瘤细胞）。 * * * 中国ALK阳性非小细胞肺癌诊断专家共识 ALK检测流程图 ——专家组推荐： 适合ALK融合基因诊断的肿瘤样本，包括各种组织样本和细胞学标本。 组织标本获取手段包括手术标本、支气管镜、经皮肺穿刺、淋巴结活检、手术活检等 对于恶性胸腔积液、心包积液、痰液或支气管灌洗液、细胞学穿刺和外周血肿瘤细胞等样本，在细胞数量充足条件下可制备细胞学样本蜡块（cell block），检测方法可采用FISH或IHC 如果是新鲜细胞标本可考虑采用特异性PCR方法。考虑到细胞学样本的细胞数量少等特点，细胞学标本的检测结果解释需格外谨慎 NSCLC 活检组织标本 阴性或未知； 据组织类型选择合适技术§ 新鲜标本 Ventana IHC 常规IHC检测* 阳性 FISH RT-PCR＆（qPCR、多重PCR或RACE-PCR-Seq） EFGR突变且使用EGFR-TKIs后出现原发或继发耐药的患者 石蜡标本 3+/2+/1+ 阴性 ALK阳性非小细胞肺癌 EGFR突变检测 采用高灵敏度的检测系统后，有越来越多的数据支持使用IHC作为初步筛查 灵敏度和特异度都可达到100％，但是不同研究间有差异 与FISH相比，IHC是一种更常规的技术，成本更低，且工作强度也更低 ALK IHC FISH 患者1： IHC显示ALK强表达，FISH显示重排 患者2： IHC显示无ALK表达，FISH显示无重排 IHC用于检测ALK表达 Mino-Kenudson et al., Clin Cancer Res 2010;16:1561–1571. 常规IHC的抗体选择 常规IHC敏感性高（假阴性率低），特异性低（假阳性高），因此建议IHC阳性患者（无论1+，2+，3+）均需FISH、RT-PCR、Ventana IHC确诊） E Thunissen, et al. Virchows Arch(2012)461:245-257 常规IHC与FISH的吻合性良好 研究 病例数 FISH IHC 3+ IHC 2+ IHC 1+ IHC 0 Yi 2011 101 阳性 8 1 1 0 阴性 0 2 20 69 Paik 2011 640 阳性 22 6 0 0 阴性 0 10 16 586 Park 2012 262 阳性 9 11 5 0 阴性 0 2 1 234 JH,Paik 2012 735 阳性 15 13 0 0 阴性 0 7 20 680 X Han 119 阳性 37 7 1 0 阴性 2 1 5 66 Total 1857 阳性 91 38 7 0 阴性 2 22 62 1635 A. J.Weickhardt, et al. Cancer. 2012 Dec 20. doi: 10.1002/cncr.27913 Total 1857 阳性 91 38 7 0 阴性 2 22 62 1635 价格便宜，适合于NSCLC患者的筛选 操作流程简单、易行 判读标准主观 操作流程需标准化 优势 IHC（3+）与FISH（+）符合率98% 劣势 IHC（2+）与FISH（+）符合率63% IHC（+）与FISH（+）符合率10% IHC（-）与FISH（-）符合率100% ALK 常规IHC与克唑替尼疗效存在相关性 E L. Kwak, et al. N Engl J Med 2010;363:1693-1703 IHC阳性，FISH阴性克唑替尼治疗有效 54岁，女性，腺癌 IHC 阳性（左图） FISH阴性（右图） ROS1与cMET均阴性 Crizotinib 250mg bid 治疗有效，肿瘤PR JM Sun, et al. J Thoracic Oncol, 2012 Case Report IASLC/CAP/AMP，2013肺癌分子检测指南 ALK IHC检测，如经过仔细确认，可考虑作为ALK FISH诊断前的筛选方法 NI Lindeman, et al. 2012 CAP, doi: 10.5858/arpa.2012-0720-OA 常规手动IHC注意事项及判读标准 “采用IHC法需注意以下两点。第一，由于ALK的蛋白表达与神经外胚层的分化有关，故其可能在小细胞肺癌和正常人的脑组织中存在表达。因此，不建议在小细胞肺癌中使用ALK融合蛋白的IHC检测。第二，IHC的阳性标准判定尚未统一。常规IHC判读标准如下：IHC 3+：5%的肿瘤细胞呈现颗粒状细胞质强着色；IHC 2+：5%的肿瘤细胞呈现中度细胞质着色；IHC 1+：5%的肿瘤细胞呈现微弱或模糊的细胞质着色或≤5%的肿瘤细胞有任何程度的着色；IHC 0：肿瘤细胞无着