Bt杀虫蛋白聚丙烯酸树脂Ⅱ号微胶囊及微球的制备.doc

PAGE PAGE 1 苏云金芽胞杆菌Bt杀虫蛋白聚丙烯酸树脂Ⅱ号微胶囊及微球的制备 张明政1,2，林乃铨2，刘波1* （1.福建省农业科学院农业生物资源研究所微生物研究中心；2.福建农林大学生物防治研究所） 1引言 通过将Ｂt杀虫蛋白质进行微胶囊化，避免紫外线、雨水等自然因素还有胃酸的对晶体蛋白活性的影响，从而提高杀虫效果。 2．材料与方法 丙烯酸树脂Ⅱ号，Bt蛋白溶液，明胶，聚乙二醇，褐藻酸钠，蓖麻油等。复相乳液法制备聚丙烯酸树脂微Ⅱ号微胶囊, 试验组1：溶液Ⅰ的配置，正确称取1g丙烯酸树脂Ⅱ号，溶于20ml无水乙醇中。然后加入1ml蓖麻油，磁力搅拌器混合均匀，再加入1ml提取好的Bt蛋白质溶液，搅拌均匀，置于超声波破碎机中进行分散，时间10min,超声时间2s，间隙时间1s，冰浴冷却，得到溶液Ⅰ。溶液Ⅱ的配置，称取1.5g的明胶溶于150ml水中，温度30℃,得到溶液Ⅱ。微胶囊的生成，在溶液Ⅱ磁力搅拌器快速搅拌下，将溶液Ⅰ用注射器缓缓加入溶液Ⅱ中， 图1 去除溶剂方法 试验组2：在操作相同的情况下，将超声时间变为原来的1/2（5min）,制备微胶囊。镜检观察。聚丙烯酸树脂Ⅱ号微球的制备，1g聚丙烯酸树脂Ⅱ号溶于50ml无水乙醇中，加入1ml预先制备好的Bt蛋白质溶液，混合均匀，为溶液Ⅰ,将溶液Ⅰ在磁力搅拌器剧烈搅拌下，缓缓加入到100ml液体石蜡中（内含1ml蓖麻油）。乳化30min后，采用如图1所示的方法去除溶剂无水乙醇。待闻不到乙醇的味道约2h，离心收集，石油醚洗涤三次。镜检观察微球的形态。 3试验结果 微胶囊：通过复相乳液法制备的微胶囊，其形态近乎圆形，大小不均匀，但没有粘附在一起的现象，从外表形态来看，比较理想。通过试验2组对比来看，其比试验1组微胶囊的颗粒直径大，但共同的问题是颗粒大小不等。这可能与分散乳液的方式有关，采用超声波分散，效果不如采用高速的机械搅拌方式（图2）。 微球：通过微球的制备，对比微胶囊其形态与微胶囊很相像，但有粘附一起的现象，其形态也多种多样，相同倍数不同视眼的形态特征差别很大，具体影响因素很难分析，需要进一步重复试验验证（图3）。 微胶囊试验组1 （40*15倍） 微胶囊试验组1（100*15倍） 微胶囊试验组2(40*15倍) 微胶囊试验组2（100*15倍） 图2 微胶囊形态 微球（10*15倍） 微球（10*15倍） 图3 微球形态 微球（40*15倍） 微球(40*15倍) 微球（100*15倍） 微球（100*15倍） 图3 微球形态 参考文献 [1] 杨巨飞，邱利焱 ，金一，沈圆圆. 口服胸腺肽肠溶微球的制备及其体内外评价. 中国药学杂志2006（11）：1638-1641  3条引物区分青枯雷尔氏菌强致病力菌株及其致弱菌株和部分强致病力菌株的序列 引言 细菌性青枯病是一种由青枯雷尔氏菌引起的毁灭性土传病害。青枯雷尔氏菌可危害几百种植物，寄主植物包括 ADDIN EN.CITE EndNoteCiteAuthor康耀卫/AuthorYear1994/YearRecNum630/RecNumrecorddatabase name=Ralstonia_solanacearum.enl path=C:\Documents and Settings\Administrator\桌面\Ralstonia_solanacearum.enlRalstonia_solanacearum.enl/databasesource-app name=EndNote version=8.0EndNote/source-apprec-number630/rec-numberref-type name=Journal Article17/ref-typecontributorsauthorsauthorstyle face=normal font=default size=100%康耀卫,/style/authorauthorstyle face=normal font=default size=100%何礼远,/style/author/authors/contributorstitlestitlestyle face=normal font=default size=100%青枯菌无毒自发突变株接种花生引起的生化变化/style/titlesecondary-titlestyle face=normal font=default size=100%中国油料/style/secondary-title/titlespagesstyle face=normal font=default size=100%38-40/style/pagesvolumestyle face=normal fo