第一章 微生物的形态和结构_培训课件.ppt

4)细胞壁缺陷细菌： 缺壁突变——L型细菌 实验室或宿 主体内形成 彻底去尽——原生质体（ G+） 缺 壁 人工去壁 细 菌 部分去除——球状体 （G-） 在自然界长期进化中形成——枝原体 （1）L型细菌 指那些实验室或宿主体内通过自发突变而形成的遗传性稳定的细胞壁缺陷菌株。 （2）原生质体（protoplast)：是指在人为条件下，用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素抑制新生细胞壁合成后，所得到的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状渗透敏感细胞，一般由革兰氏阳性细菌形成。 经溶菌酶或青霉素处理后，还残留了部分细胞壁(尤其是G― 细菌的外膜)的原生质体。通常由G― 细菌形成。?4. 支原体(Mycoplasma) ?无细胞壁的原核微生物。因其细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇，其细胞膜仍有较高的机械强度。 ?3. 原生质球(sphaeroplast) 1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染。 2、用碘溶液进行媒染。其作用是提高染料和细 胞间的相互作用从而使二者结合得更牢固。 3、用乙醇或丙酮冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 胞呈无色。 4、用一种与结晶紫具有不同颜色的碱性染料对 涂片进行复染。例如沙黄，它使原来无色的 革兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革 兰氏阳性细菌继续保持深紫色 ★革兰氏染色步骤： (1)细胞壁 5)革兰氏染色的机制 革兰氏染色 (1)细胞壁 细菌细胞壁的结构及其化学组成决定了革兰氏染色反应。 由于G+菌细胞壁肽聚糖层较厚，且其含量高，交联度高，不 含有类脂或含量很低，脱色处理时，因乙醇的脱水作用引起 细胞壁肽聚糖层网架结构中的孔径缩小，通透性降低，结晶 紫与碘的复合物被保留在细胞内，细胞不被脱色，再用沙黄 复染仍保留最初的紫色；反之，由于G―菌肽聚糖层薄，且 其含量低，交联度低而外膜层类脂含量高，脱色处理时，G― 菌的外膜经乙醇的脱脂作用，溶解了外膜层中的类脂而变得 疏松，此时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合 物的渗出，因此细胞退成无色，再用沙黄复染菌体呈红色。 ★革兰氏染色原理： (1)细胞壁 革兰氏阳性细菌和阴性细菌的比较 革兰氏染色的原理 ①维持菌体固有形状;②具有保护作用，免受细胞受机 械性或渗透压的破坏;③细胞壁有许多微孔(1～10nm)， 对大分子物质有阻拦作用 ④协助鞭毛的运动。细胞壁是某 些细菌鞭毛的伸出支柱点;⑤与横隔壁的形成有关。将原细 菌细胞分裂为两个子细胞。 细胞壁的主要功能 ★ 图1-5 革兰氏阳性菌与革兰氏阴性菌 细胞壁构造的比较 G+与Gˉ细菌细胞壁区别 (1)细胞壁 ★G+和G-细菌细胞壁化学成分的比较 仅由肽聚糖骨架(双糖单位)、 四肽侧链(四肽尾) 和交联桥(肽桥)三部分组成。 原核生物所特有的已糖 肽聚糖骨架由N-乙酰葡萄糖胺(NAG)和N-乙酰胞壁酸(NAM)通过β-1,4-苷键交替连接成的多糖链，每条多糖链含10～65个双糖单位 双糖单位 肽聚糖结构 图1-6 G+细菌肽聚糖的立体结构(片段) 1） G+细菌细胞壁 1、细胞壁 A、肽聚糖 由四个氨基酸分子按L型 与D型交替方式连接而成 溶菌酶的溶菌作用：双糖单位中的β-1,4-糖苷键很容易被溶菌酶(lysozyme)所水解，从而引起细菌因肽聚糖细胞壁的“散架”而死亡。 肽聚糖 图1-7 金黄色葡萄球菌的肽聚糖结构 M：N-乙酰胞壁酸;G：N-乙酰葡萄糖 丙谷赖丙：四肽侧链;x：甘氨酸五肽 肽聚糖结构 G+ 特点：厚度大（20-80nm），有15-50层，化学组分简单，一般只含90%肽聚糖和10%磷壁酸、少量的表面蛋白质，一般不含类脂质。 细菌细胞壁 跨越肽聚糖层 并与细胞膜相 交联的膜磷壁 酸（又称脂磷 壁酸），由甘 油磷酸链分子 与细胞膜上的 磷脂进行共价 结合后形成。 磷壁酸 革兰氏阳性细菌细胞壁上特有的化学成分，主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸。 壁磷壁酸，它与肽 聚糖分子间进行共 价结合，含量会随 培养基成分而改变 1）G+细菌细胞壁 ?